GABARAP-リン脂質コンジュゲートのリソソーム転換は、MTORキナーゼシグナル伝達経路の不活性化なしに、C2C12細胞を筋管に分化させた際に活性化されます。

過剰発現したGABARPのリン脂質への共役は、飢star誘発オートファジー中に報告されていますが、内因性ガバラップリン脂質の結合が飢star条件下でも活性化されるかどうかは不明です。内因性LC3-リン脂質コンジュゲート（LC3-II）が蓄積したのに対し、マウス肝臓および腎臓にgabarap-リン脂質コンジュゲート（gabarap-pl）の蓄積（gabarap-pl）の蓄積はほとんど観察されませんでした。飢starとは無関係に、心臓に少量の内因性ガバラップ-PLが観察されました。ラパマイシン処理HEK293細胞では、リソソームプロテアーゼ阻害剤の存在下でも内因性GABARAP-PLの蓄積はほとんどありませんでしたが、MTORキナーゼ署名経路の不活性化とともに内因性LC3-IIの有意な蓄積がありました。HELAおよびC2C12細胞では、リソソームプロテアーゼ阻害剤の存在下でのGABARAP-PLの蓄積は、飢star誘発オートファジーとは無関係でしたが、LC3-IIの蓄積は飢ation誘発オートファジー中に有意でした。興味深いことに、LC3-IIのリソソーム転換の増加とともに、C2C12細胞の筋管への分化中のGABARAP-PLのリソソーム転換の活性化が観察されました。これらの条件下では、S6リボソームタンパク質は依然としてリン酸化されており、飢star誘発性オートファジーとは対照的に、C2C12細胞の筋管への分化中にmTORキナーゼシグナル伝達経路が活性であることを示唆しています。これらの結果は、MTORキナーゼシグナル伝達経路の不活性化なしにC2C12細胞の筋管への分化中にGABARAP-PLのリソソーム転換が活性化されたのに対し、GABARAP-PLの少量のリソソーム転換は星が誘発されたオートファジー中に活性化されたことを示しています。

Although conjugation of overexpressed GABARP to phospholipid has been reported during starvation-induced autophagy, it is unclear whether endogenous GABARAP-phospholipid conjugation is also activated under starvation conditions. We observed little accumulation of GABARAP-phospholipid conjugate (GABARAP-PL) in mouse liver and kidney under starvation conditions, whereas endogenous LC3-phospholipid conjugate (LC3-II) accumulated. A small amount of endogenous GABARAP-PL was observed in the heart, independent of starvation. In rapamycin-treated HEK293 cells, there was little accumulation of endogenous GABARAP-PL, even in the presence of lysosomal protease-inhibitors, whereas there was significant accumulation of endogenous LC3-II, together with inactivation of the mTor kinase-signaling pathway. In HeLa and C2C12 cells, GABARAP-PL accumulation in the presence of lysosomal protease inhibitors was independent of starvation-induced autophagy, whereas LC3-II accumulation was significant during starvation-induced autophagy. Interestingly, we observed activation of lysosomal turnover of GABARAP-PL during the differentiation of C2C12 cells to myotubes, along with increased lysosomal turnover of LC3-II. Under these conditions, S6 ribosomal protein was still phosphorylated, suggesting that the mTor kinase-signaling pathway is active during the differentiation of C2C12 cells to myotubes, in contrast to starvation-induced autophagy. These results indicated that lysosomal turnover of GABARAP-PL was activated during the differentiation of C2C12 cells to myotubes without inactivation of the mTor kinase-signaling pathway, whereas little lysosomal turnover of GABARAP-PL was activated during starvation-induced autophagy.