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Nucleic acids research1990Mar11Vol.18issue(5)

マウス精子形成中のHPRT、PGK-1、PGK-2、APRT、MTASE、およびZFY遺伝子転写産物のHPRT、PGK-1、PGK-2、MTASE、およびZFY遺伝子転写産物の定量的PCRによる測定

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
概要
Abstract

逆転写酵素 - ポリメラーゼ連鎖反応アッセイ(RT-PCR)を定量的に使用して、さまざまな精子形成段階で雄の生殖細胞に由来する総マウスRNAのRNA転写産物の累積レベルを測定しました。2つのX結合酵素、ホスホグリセリ酸キナーゼ(PGK-1)およびヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ(HPRT)のRNAレベルは、両方とも精子形成中に減少しますが、転写産物レベルはPGK-1ではるかに急速に減少します。Y結合ZFY(亜鉛フィンガータンパク質)のRNAは、テストされたすべての精子形成細胞画分で上昇し、特にレプトテン/接合体精子細胞と丸い精子細胞で特に高くなっています。アデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(APRT)のRNAは、後期のパチネマ中に5倍増加します。精子細胞細胞では検出できないPGK-2のRNAは、丸い精子細胞段階で少なくとも50倍増加します。DNA(シトシン-5-) - メチルトランスフェラーゼ(MTase)転写産物レベルは、非分別肝細胞よりも精子形成を通じて数桁以上高くなっています。

逆転写酵素 - ポリメラーゼ連鎖反応アッセイ(RT-PCR)を定量的に使用して、さまざまな精子形成段階で雄の生殖細胞に由来する総マウスRNAのRNA転写産物の累積レベルを測定しました。2つのX結合酵素、ホスホグリセリ酸キナーゼ(PGK-1)およびヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ(HPRT)のRNAレベルは、両方とも精子形成中に減少しますが、転写産物レベルはPGK-1ではるかに急速に減少します。Y結合ZFY(亜鉛フィンガータンパク質)のRNAは、テストされたすべての精子形成細胞画分で上昇し、特にレプトテン/接合体精子細胞と丸い精子細胞で特に高くなっています。アデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(APRT)のRNAは、後期のパチネマ中に5倍増加します。精子細胞細胞では検出できないPGK-2のRNAは、丸い精子細胞段階で少なくとも50倍増加します。DNA(シトシン-5-) - メチルトランスフェラーゼ(MTase)転写産物レベルは、非分別肝細胞よりも精子形成を通じて数桁以上高くなっています。

A reverse transcriptase-polymerase chain reaction assay (RT-PCR) was used quantitatively to measure accumulated levels of RNA transcripts in total mouse RNAs derived from male germ cells at various spermatogenic stages. RNA levels for two X-linked enzymes, phosphoglycerate kinase (PGK-1) and hypoxanthine phosphoribosyl transferase (HPRT), both decrease during spermatogenesis, although the transcript levels decrease much more rapidly for PGK-1. RNA for the Y-linked ZFY (zinc finger protein) is elevated in all spermatogenic cell fractions tested, being particularly high in leptotene/zygotene spermatocytes and round spermatids. RNA for adenine phosphoribosyltransferase (APRT) increases 5-fold to a peak during late pachynema. RNA for PGK-2, undetectable in spermatogonial cells, increases at least 50-fold by the round spermatid stage. DNA (cytosine-5-)-methyltransferase (MTase) transcript levels are over an order of magnitude higher throughout spermatogenesis than in non-dividing liver cells.

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