日本のシカドの葉からのマンノース結合ジャカリン関連レクチンのクローニングと発現（CYCAS Revoluta Thunb）

マンノース認識ジャカリン関連のレクチン（MJRL）であるCYCADリーフレクチン（CRLL）は、最初に体育館レクチンとしてクローン化され、発現しました。291アミノ酸残基をコーディングするCRLL（DDBJ、アクセッション番号AB198328）のcDNA配列は、日本の栗MJRLとしてN-およびC末端ドメインに分割された約150のアミノ酸のタンデムリピートを持っています。シーケンスアライメントは、シーケンスの削除と挿入を示し、その推定炭水化物結合部位は他のJRLといくつかの違いを示しました。PCR分析により、このレクチンはcYCAD葉で発現しているが、根や種子では発現しなかったことが示されました。組換えCRLL（RCRLL）は、大腸菌で発現し、再展開後のアフィニティクロマトグラフィーによって精製されました。アクティブなRCRLLの特性は、ネイティブCRLLの特性とほぼ同じように見えました。

Cycad leaf lectin (CRLL), a mannose-recognizing jacalin-related lectin (mJRL), was first cloned as a gymnosperm lectin and expressed. The cDNA sequence of CRLL (DDBJ, accession no. AB198328), coding 291 amino acid residues, has a tandem repeat of about 150 amino acids divided into N- and C-terminal domains as Japanese chestnut mJRL. Sequence alignment showed deletion and insertion of the sequence, and its putative carbohydrate-binding sites showed some differences from other JRLs. PCR analysis showed that this lectin was expressed in the cycad leaf but not in the root or seed. Recombinant CRLL (rCRLL) was expressed in Escherichia coli and purified by affinity chromatography after refolding procedures. Properties of active rCRLL appeared to be almost the same as those of native CRLL.