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シロイヌナズナの凍結酸（FOA）耐性変異体は、エチルメタンスルホン酸（EMS）変異化コロンビア種子のM2集団をスクリーニングすることにより分離されました。FOA耐性は、核劣性遺伝子、FOR1-1によるものであり、染色体の519 kb領域に位置します。FOR1-1/FOR1-1植物の耐性は、酵素活性の変化によるものではありませんでした。放射標識プリン、ピリミジン、および[14C] FOAを使用した取り込み研究は、For1-1/For1-1植物がウラシルまたはウラシル様塩基の取り込みに特に欠陥があることを明らかにしています。このような特異性を確認するために、遺伝的交差は、for1がデオキシウリジンヌクレオシド輸送体をコードするFur1との異なる遺伝子座であることを示しています。さらに、Cauliflower Mosaic Virus（CAMV）35Sプロモーターによって駆動されるEscherichia coli Uracilトランスポーター遺伝子URAAとの形質転換により、FOR1-1/FOR1-1植物をFOA感受性に回復しました。分子マッピング研究は、For1がシロイヌナズナのゲノムで特定された6つの既知の核塩基トランスポーターファミリーのいずれかに属する遺伝子座に対応していないことを明らかにしています。さらに、FOR1は、ウラシル輸送体エンコード遺伝子座AT2G03590またはAT2G03530の転写レベルを調節していないようです。上記の結果は、FOR1-1変異体対立遺伝子がウラシルの取り込みに特有の輸送メカニズムに影響を与えることを強く示唆しています。
シロイヌナズナの凍結酸（FOA）耐性変異体は、エチルメタンスルホン酸（EMS）変異化コロンビア種子のM2集団をスクリーニングすることにより分離されました。FOA耐性は、核劣性遺伝子、FOR1-1によるものであり、染色体の519 kb領域に位置します。FOR1-1/FOR1-1植物の耐性は、酵素活性の変化によるものではありませんでした。放射標識プリン、ピリミジン、および[14C] FOAを使用した取り込み研究は、For1-1/For1-1植物がウラシルまたはウラシル様塩基の取り込みに特に欠陥があることを明らかにしています。このような特異性を確認するために、遺伝的交差は、for1がデオキシウリジンヌクレオシド輸送体をコードするFur1との異なる遺伝子座であることを示しています。さらに、Cauliflower Mosaic Virus（CAMV）35Sプロモーターによって駆動されるEscherichia coli Uracilトランスポーター遺伝子URAAとの形質転換により、FOR1-1/FOR1-1植物をFOA感受性に回復しました。分子マッピング研究は、For1がシロイヌナズナのゲノムで特定された6つの既知の核塩基トランスポーターファミリーのいずれかに属する遺伝子座に対応していないことを明らかにしています。さらに、FOR1は、ウラシル輸送体エンコード遺伝子座AT2G03590またはAT2G03530の転写レベルを調節していないようです。上記の結果は、FOR1-1変異体対立遺伝子がウラシルの取り込みに特有の輸送メカニズムに影響を与えることを強く示唆しています。
A fluoroorotic acid (FOA)-resistant mutant of Arabidopsis thaliana was isolated by screening M2 populations of ethyl methane sulphonate (EMS)-mutagenized Columbia seed. FOA resistance was due to a nuclear recessive gene, for1-1, which locates to a 519 kb region in chromosome 5. Assays of key regulatory enzymes in de novo pyrimidine synthesis (uridine monophosphate synthase) and salvage biochemistry (thymidine kinase) confirmed that FOA resistance in for1-1/for1-1 plants was not due to altered enzymatic activities. Uptake studies using radiolabelled purines, pyrimidines, and [14C]FOA reveal that for1-1/for1-1 plants were specifically defective in the uptake of uracil or uracil-like bases. To confirm such specificity, genetic crosses show that FOR1 is a distinct locus from FUR1 which encodes a deoxyuridine nucleoside transporter. In addition, for1-1/for1-1 plants were restored to FOA sensitivity by transformation with the Escherichia coli uracil transporter gene uraA driven by the cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter. Molecular mapping studies reveal that FOR1 does not correspond to loci belonging to any of the six known nucleobase transporter families identified in the Arabidopsis genome. Moreover, FOR1 does not appear to regulate the transcript levels of either uracil transporter-encoding loci At2g03590 or At2g03530. The above results strongly suggest that the for1-1 mutant allele affects a transport mechanism that is specific for the uptake of uracil.
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