肝臓のリアノジン受容体

リアノジン受容体は、主に骨格および心筋収縮を制御する筋細胞質網状体からのCa2+放出チャネルと見なされています。しかし、多くの研究は、それが広く表現されており、機能は筋肉収縮に限定されていないことを示しています。この研究では、リアノジン受容体が肝臓のカルシウムシグナル伝達に役割を果たすかどうかを調べました。分離された肝細胞のRT-PCR分析は、切り捨てられた1型リアノジン受容体の発現を示しましたが、2型または3型メッセージは検出されませんでした。また、ミクロソーム細胞画分および透過肝細胞の[3H]リアノジンの結合部位を検出しました。この結合は、カフェインとダントロレンによって変位しましたが、Ruthenium Red、ヘパリン、または環状ADPリボースによっては変位しませんでした。リアノジンは、それ自体、無傷の灌流ラット肝臓内の一次培養肝細胞または肝細胞のいずれかのCa2+振動を引き起こしませんでした。しかし、両方の準備で、リアノジンは、アルファ1アドレナリン受容体アゴニストによって誘発されたサイトゾルフリー[Ca2+]振動の頻度を有意に増加させました。透過化肝細胞の実験により、リアノジンと環状ADPリボースの両方が細胞内貯蔵から遅いCa2+漏れを引き起こし、イノシトール1,4,5-トリフィン酸のサブしかめた用量に対するCa2+リリースした応答を増加させることができることが示されました。私たちの発見は、ラット肝細胞における1型リアノジン受容体の新規切り捨てられた形態の存在を示唆しています。リアノジンは、振動頻度を増加させることにより、サイトゾルを含まない[Ca2+]振動のパターンを調節します。小胞体上のリアノジン受容体から放出されるCa2+は、イノシトール1,4,5-三リン酸受容体に関する陽性フィードバックのためにCa2+のプールの増加を提供することを提案します。

The ryanodine receptor has been mainly regarded as the Ca2+ release channel from sarcoplasmic reticulum controlling skeletal and cardiac muscle contraction. However, many studies have shown that it is widely expressed, with functions not restricted to muscular contraction. This study examined whether ryanodine receptor plays a role in calcium signaling in the liver. RT-PCR analysis of isolated hepatocytes showed expression of a truncated type 1 ryanodine receptor, but no type 2 or type 3 message was detected. We also detected binding sites for [3H]ryanodine in the microsomal cellular fraction and in permeabilized hepatocytes. This binding was displaced by caffeine and dantrolene, but not by ruthenium red, heparin or cyclic ADP-Ribose. Ryanodine, by itself, did not trigger Ca2+ oscillations in either primary cultured hepatocytes or hepatocytes within the intact perfused rat liver. In both preparations, however, ryanodine significantly increased the frequency of the cytosolic free [Ca2+] oscillations evoked by an alpha1 adrenergic receptor agonist. Experiments in permeabilized hepatocytes showed that both ryanodine and cyclic ADP-ribose evoked a slow Ca2+ leak from intracellular stores and were able to increase the Ca2+-released response to a subthreshold dose of inositol 1,4,5-trisphosphate. Our findings suggest the presence of a novel truncated form of the type 1 ryanodine receptor in rat hepatocytes. Ryanodine modulates the pattern of cytosolic free [Ca2+] oscillations by increasing oscillation frequency. We propose that the Ca2+ released from ryanodine receptors on the endoplasmic reticulum provides an increased pool of Ca2+ for positive feedback on inositol 1,4,5-trisphosphate receptors.