E-カドヘリンリプレッサーを発現する上皮細胞の遺伝的プロファイリングは、上皮間葉系遷移におけるカタツムリ、ナメクジ、およびE47因子の明確な役割を明らかにしています

転写因子カタツムリ、スラグ、およびBHLH E47は、最近、上皮細胞で過剰発現した場合、上皮間葉系遷移（EMT）および浸潤のe-カドヘリンおよび誘導者の直接抑制因子として説明されています。腫瘍の進行と浸潤におけるこれらの要因の役割は提案されていますが、異なるリプレッサーが腫瘍形成プロセスで明確な役割または冗長な役割を果たしているかどうかは確立されていません。この重要な問題をさらに調査するために、異なる抑制因子（MDCK-SNAIL、MDCK-SLUG、およびMDCK-E47細胞）を発現するMadin-Darby犬腎臓（MDCK）上皮細胞の遺伝子発現プロファイリングを分析しました。マイクロアレイ。合計243個のクローン（228個の遺伝子と15個の発現配列タグ）が、3つのMDCK由来細胞株のいずれかとコントロールMDCK細胞のいずれかの間で差次的に発現することがわかりました。22の候補遺伝子は、ノーザンブロット、ウエスタンブロット、免疫蛍光、および細胞株のプロモーター分析と、異種移植腫瘍の免疫組織化学によって検証されました。遺伝子クラスタリング分析では、243の候補遺伝子の約3分の1がカタツムリ、ナメクジ、またはE47因子を発現するMDCK細胞に共通しているのに対し、残りの遺伝子は1つまたは2つの細胞タイプでのみ調節されていたことが示されました。差別的に調節された遺伝子には、EMT（45遺伝子）、転写調節（18遺伝子）、細胞増殖およびシグナル伝達（54遺伝子）、アポトーシス（12遺伝子）、および血管新生（9遺伝子）に関連する遺伝子が含まれます。これらの結果は、カタツムリ、ナメクジ、およびE47転写因子が一般的かつ特定の遺伝子プログラムを誘導し、腫瘍の進行と浸潤における因子の異なる役割をサポートしていることを示しています。

The transcription factors Snail, Slug, and bHLH E47 have been recently described as direct repressors of E-cadherin and inducers of epithelial-mesenchymal transition (EMT) and invasion when overexpressed in epithelial cells. Although a role of those factors in tumor progression and invasion has been proposed, whether the different repressors play distinct or redundant roles in the tumorigenic process has not been established. To further investigate this important issue, we have analyzed the gene expression profiling of Madin-Darby canine kidney (MDCK) epithelial cells expressing the different repressors (MDCK-Snail, MDCK-Slug, and MDCK-E47 cells) versus control MDCK cells by cDNA microarrays. A total of 243 clones (228 genes and 15 expressed sequence tags) were found to be differentially expressed between either of the three MDCK-derived cell lines and control MDCK cells. Twenty two of the candidate genes were validated by Northern blot, Western blot, immunofluorescence, and promoter analyses in cell lines and by immunohistochemistry in xenografted tumors. Gene clustering analysis indicated that about a third of the 243 candidate genes were common to MDCK cells expressing Snail, Slug, or E47 factors, whereas the rest of the genes were regulated in only one or two cell types. Differentially regulated genes include those related to EMT (45 genes), transcriptional regulation (18 genes), cell proliferation and signaling (54 genes), apoptosis (12 genes), and angiogenesis (9 genes). These results indicate that Snail, Slug, and E47 transcription factors induce common and specific genetic programs, supporting a differential role of the factors in tumor progression and invasion.