ミエリン関連の糖タンパク質：膜処理、免疫グロブリン様ドメイン間の新規ジスルフィド結合の証拠、および翻訳後のパルマイレーション

ミエリン関連糖タンパク質（MAG）は、髄膜細胞と軸索との細胞相互作用で機能する免疫グロブリン遺伝子スーパーファミリーのメンバーです。この論文では、これらのタンパク質の構造的特徴を特徴付けました。型1型膜タンパク質としての二重層におけるMAGの処分（細胞外液端端、単一膜貫通セグメント、および細胞質カルボキシ末端を含む）は、in vitroおよび病気の特定のアンチボディスの免疫栄養研究におけるミクロール栄養研究においてミクロソームに挿入されたMAGコトランスルに挿入されたMAGコトランスレーションのプロテアーゼ保護研究で実証されました。推定膜にまたがるセグメントを欠く遺伝子組み換えMAG cDNAが構築され、分泌タンパク質をコードすることが示されました。これらの結果は、膜貫通セグメントとしてのこの疎水性配列の識別を確認します。分泌されたタンパク質の配列決定により、切断されたシグナル配列の存在とシグナルペプチダーゼ切断の部位が示されました。エクトドメインのジスルフィド結合パターンを特徴付けるために、MAGを臭化シアンで切断し、抗体のパネルを使用して、非還元条件下で特定の断片を共感しました。これらの研究は、細胞外セグメントの2つの免疫グロブリンドメイン間の新しいジスルフィド結合のサポートを提供します。最後に、MAGは膜内チオエステル連鎖を介して翻訳後にパーマリチル化されていることを報告します。これらの研究に基づいて、細胞接着分子としての機能に関して考慮されるRGD配列を含むMAGの立体構造のモデルを提案します。

The myelin-associated glycoproteins (MAG) are members of the immunoglobulin gene superfamily that function in the cell interactions of myelinating glial cells with axons. In this paper, we have characterized the structural features of these proteins. The disposition of MAG in the bilayer as a type 1 integral membrane protein (with an extracellularly disposed amino terminus, single transmembrane segment, and cytoplasmic carboxy terminus) was demonstrated in protease protection studies of MAG cotranslationally inserted into microsomes in vitro and in immunofluorescent studies with site specific antibodies. A genetically engineered MAG cDNA, which lacks the putative membrane spanning segment, was constructed and shown to encode a secreted protein. These results confirm the identify of this hydrophobic sequence as the transmembrane segment. Sequencing of the secreted protein demonstrated the presence of a cleaved signal sequence and the site of signal peptidase cleavage. To characterize the disulfide linkage pattern of the ectodomain, we cleaved MAG with cyanogen bromide and used a panel of antibodies to coprecipitate specific fragments under nonreducing conditions. These studies provide support for a novel disulfide linkage between two of the immunoglobulin domains of the extracellular segment. Finally, we report that MAG is posttranslationally palmitylated via an intramembranous thioester linkage. Based on these studies, we propose a model for the conformation of MAG, including its RGD sequence, which is considered with regard to its function as a cell adhesion molecule.