長期培養豚骨髄由来間葉系幹細胞の異種移植

豚由来のMSCは効率的に分離され、選択された成長因子が追加された低胎児血清含有量成長培地を使用して広範囲に拡大しました。> OR = 96細胞集団倍長（PD）の後、MSCには細胞遺伝学的異常が欠けていました。in vitro軟骨形成および骨形成分化能力は、80 PDの後に保存されました。治療効果をテストするために、1 x 10（6）80-PD MSCを、急性心筋梗塞時に免疫不全（非肥満糖尿病/重度の免疫不全）マウスの心臓の筋膜炎帯に直接注入されました。生着されたMSCは、少なくとも4週間、梗塞の心臓で生き残りました。施設後2週間および4週間の心エコー検査により、肥満が塩分を受けている梗塞心臓を受けている梗塞心臓の左心室駆出率の有意な保存が生理食塩水を投与されたことが明らかになりました。ペリインファークゾーンの毛細血管は、MSC処理の心臓では、他の心臓の梗塞グループよりもよく保存されていましたが、梗塞サイズはすべてのグループで匹敵しました。まれな生着MSCのみが心臓特異的または内皮細胞特異的マーカーを発現しました。したがって、80-PD MSCは、MSCの心筋細胞または内皮細胞への分化を最小限に抑えたにもかかわらず、梗塞心臓の機能的改善を促進する能力を保持しました。これらのデータは、MSC移植の有益な効果が、天然の心臓および血管細胞に対するMSCリリース物質の栄養効果に起因する可能性が最も高いことを示唆しています。治療効果を失うことなくMSC系統を大幅に拡張する能力は、急性冠症候群の患者の介入に「棚から」MSCが必要になる臨床環境で有用であることが証明される可能性があります。

Swine-derived MSCs were efficiently isolated and extensively expanded using a low fetal serum content growth medium to which selected growth factors were added. After > or =96 cell population doublings (PDs), MSCs were devoid of cytogenetic abnormalities. In vitro chondrogenic and osteogenic differentiation capacity was preserved after 80 PDs. To test therapeutic efficacy, 1 x 10(6) 80-PD MSCs were injected directly into the peri-infarct zone of hearts of immunodeficient (non-obese diabetic/severe combined immunodeficient) mice at the time of acute myocardial infarction. Engrafted MSCs survived in the infarcted hearts for at least 4 weeks. Echocardiography at 2 and 4 weeks postinfarction revealed a significant preservation of the left ventricular ejection fractions of infarct hearts receiving MSCs compared with infarct hearts receiving saline. Peri-infarct zone capillarity was better preserved in MSC-treated hearts than other infarct groups of hearts, but infarct size was comparable in all groups. Only rare engrafted MSCs expressed cardiac-specific or endothelial cell-specific markers. Hence, 80-PD MSCs retained the capacity to promote functional improvement in the infarcted heart despite minimal differentiation of MSCs into cardiomyocytes or endothelial cells. These data suggest that the beneficial effects of MSC transplantation most likely result from the trophic effects of MSC-released substances on native cardiac and vascular cells. The capacity to massively expand MSC lines without loss of therapeutic efficacy may prove to be useful in the clinical setting where "off the shelf" MSCs may be required for interventions in patients with acute coronary syndromes.