Werner症候群のタンパク質は、ICL誘導の複製逮捕に応じて、RAD51、RAD54、RAD54B、ATRの複合体に関与しています

Werner症候群（WS）は、ヒトRECQヘリカーゼファミリーのメンバーをコードするWRN遺伝子の欠陥によって引き起こされるゲノム不安定性を特徴とするまれな遺伝障害です。RECQヘリカーゼは、失速した複製フォークの修復中に相同組換え（HR）プロセスを含むいくつかのDNA代謝経路に関与しています。鎖間DNA架橋（ICL）の導入後、WRNは核小体から移動して、HRタンパク質Rad52と相互作用した核形成内の複製フォークを阻止しました。この研究では、蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）および免疫前沈殿実験を使用して、ICLによって複製が停止した細胞のRad51、Rad54、Rad54B、ATRを含むMultiprotein複合体にWRNが関与していることを実証します。in vitroでのWRN-RAD51およびWRN-RAD54Bの直接的な相互作用を確認します。私たちのデータは、ICL修復の再結合ステップにおけるWRNの役割をサポートしています。

Werner syndrome (WS) is a rare genetic disorder characterized by genomic instability caused by defects in the WRN gene encoding a member of the human RecQ helicase family. RecQ helicases are involved in several DNA metabolic pathways including homologous recombination (HR) processes during repair of stalled replication forks. Following introduction of interstrand DNA crosslinks (ICL), WRN relocated from nucleoli to arrested replication forks in the nucleoplasm where it interacted with the HR protein RAD52. In this study, we use fluorescence resonance energy transfer (FRET) and immune-precipitation experiments to demonstrate that WRN participates in a multiprotein complex including RAD51, RAD54, RAD54B and ATR in cells where replication has been arrested by ICL. We verify the WRN-RAD51 and WRN-RAD54B direct interaction in vitro. Our data support a role for WRN also in the recombination step of ICL repair.