NAK関連タンパク質1は、I型IFN誘導のTLR3と細胞質経路の両方に関与しています

TLR3および細胞質ヘリカーゼファミリータンパク質（レチノイン酸誘導性遺伝子I（RIG-I）およびメラノーマ分化関連遺伝子5（MDA5））は、DSRNAパターン認識受容体として機能します。DSRNAおよびウイルス感染の代表であるPoly（I：C）に応答して、それらは転写因子IFN調節因子（IRF）-3を活性化することが示されており、IFN-BETAプロモーターの活性化を誘導します。RIG-I/MDA5は細胞質のDSRNAを認識しますが、TLR3は細胞表面膜またはエンドソームに存在して、DSRNAの外部認識に関与します。最近の報告では、TLR3が呼吸器合胞体ウイルス（RSV）に応答して上皮細胞の細胞応答を誘導することが示唆されています。ただし、RSVによるTLR3活性化の尺度は未解決のままです。小さな干渉RNA遺伝子サイレンシングテクノロジーとヒト細胞トランスフェクタントにより、Nak関連タンパク質1（NAP1）のノックダウンが、ポリ（I：C）またはウイルス（RSVおよび水炭性門炎ウイルス）治療の24時間後のIFN-BETAプロモーター活性化のダウンレギュレーションにつながることを明らかにしました。NAP1は、TLR3経路のアダプターTOLL-IL-IL-IL Homain Containingアダプター分子（TICAM）-1（TOLL/IL-1Rドメイン誘導アダプター誘導IFNベータ）の下流に位置していますが、TICAM-1およびTLR3はIRF-3およびIFNベテマの活性化に参加しませんでした。IFN-BETAプロモーターのウイルス媒介活性化は、IFN-BETAプロモーター刺激装置-1（ミトコンドリア抗ウイルスシグナル伝達（MAVS）、ビザ、CARDIF）の遺伝子サイレンシング、Rig-I/MDA5 DSRNA認識プロテインのアダプターによって大部分が廃止されました。TLRおよびウイルスを介したIFN誘導経路の両方で、イカッパブキナーゼ関連キナーゼイプシロンとタンク結合キナーゼ1がIFN-BETA誘導に関与しました。したがって、RSVおよび他のウイルスは、IFN-BETAプロモーターの複製媒介活性化を誘導します。これは、TLR3経路ではなく、RIG-I/MDA5によって細胞内で開始されます。IRF-3およびIFN-BETAプロモーターの活性化のために、細胞質とTLR3を介したDSRNA認識経路の両方がNAP1に収束します。

TLR3 and the cytoplasmic helicase family proteins (retinoic acid-inducible gene I (RIG-I) and melanoma differentiation-associated gene 5 (MDA5)) serve as dsRNA pattern-recognition receptors. In response to poly(I:C), a representative of dsRNA, and viral infection, they have been shown to activate the transcription factor IFN regulatory factor (IRF)-3, which in turn induces activation of the IFN-beta promoter. RIG-I/MDA5 recognizes dsRNA in the cytoplasm, whereas TLR3 resides in the cell surface membrane or endosomes to engage in extracytoplasmic recognition of dsRNA. Recent reports suggest that TLR3 induces cellular responses in epithelial cells in response to respiratory syncytial virus (RSV). The modus for TLR3 activation by RSV, however, remains unresolved. By small interference RNA gene-silencing technology and human cell transfectants, we have revealed that knockdown of NAK-associated protein 1 (NAP1) leads to the down-regulation of IFN-beta promoter activation >24 h after poly(I:C) or virus (RSV and vesicular stomatitis virus) treatment. NAP1 is located downstream of the adapter Toll-IL-1R homology domain-containing adapter molecule (TICAM)-1 (Toll/IL-1R domain-containing adapter-inducing IFN-beta) in the TLR3 pathway, but TICAM-1 and TLR3 did not participate in the IRF-3 and IFN-beta promoter activation by RSV infection. Virus-mediated activation of the IFN-beta promoter was largely abrogated by the gene silencing of IFN-beta promoter stimulator-1 (mitochondria antiviral signaling (MAVS), VISA, Cardif), the adapter of the RIG-I/MDA5 dsRNA-recognition proteins. In both the TLR and virus-mediated IFN-inducing pathways, IkappaB kinase-related kinase epsilon and TANK-binding kinase 1 participated in IFN-beta induction. Thus, RSV as well as other viruses induces replication-mediated activation of the IFN-beta promoter, which is intracellularly initiated by the RIG-I/MDA5 but not the TLR3 pathway. Both the cytoplasmic and TLR3-mediated dsRNA recognition pathways converge upon NAP1 for the activation of the IRF-3 and IFN-beta promoter.