感染性膵臓壊死ウイルスからのVP4プロテアーゼの切り捨ておよび変異体型の精製、結晶化、および予備X線分析

Birnaviridaeファミリーに属するウイルスでは、ウイルスタンパク質4（VP4）は、主要なカプシドタンパク質（VP2およびVP3）をコードするポリタンパク質のタンパク質分解成熟の原因となるウイルスプロテアーゼです。アクアビルナウイルス属のプロトタイプである感染性膵臓壊死ウイルス（IPNV）は、水産養殖に大きな経済的影響を与える魚の伝染性疾患の原因剤です。IPNV VP4は、Ser/Lys触媒ダイアドメカニズム（Ser633およびLys674）を利用する226レシド（24.0 kDa）セリンプロテアーゼです。VP4のいくつかの切り捨てられた変異体型が組換え発現システムで発現され、精製され、結晶化のためにスクリーニングされました。2.4を超える2つの異なる結晶形式は、解像度を超えて回折を形成します。1つの変異体コンストラクトに由来する3分間結晶には、ユニットセルパラメーターa = 41.7、b = 69.6、c = 191.6 a、alpha = 93.0、beta = 95.1、gamma = 97.7度があります。スペースグループP6（1）22/p6（5）22の別の変異体コンストラクトから派生した六角形の結晶は、ユニットセルパラメーターa = 77.4、b = 77.4、c = 136.9 Aを持っています。

In viruses belonging to the Birnaviridae family, virus protein 4 (VP4) is the viral protease responsible for the proteolytic maturation of the polyprotein encoding the major capsid proteins (VP2 and VP3). Infectious pancreatic necrosis virus (IPNV), the prototype of the aquabirnavirus genus, is the causative agent of a contagious disease in fish which has a large economic impact on aquaculture. IPNV VP4 is a 226-residue (24.0 kDa) serine protease that utilizes a Ser/Lys catalytic dyad mechanism (Ser633 and Lys674). Several truncated and mutant forms of VP4 were expressed in a recombinant expression system, purified and screened for crystallization. Two different crystal forms diffract beyond 2.4 A resolution. A triclinic crystal derived from one mutant construct has unit-cell parameters a = 41.7, b = 69.6, c = 191.6 A, alpha = 93.0, beta = 95.1, gamma = 97.7 degrees. A hexagonal crystal with space group P6(1)22/P6(5)22 derived from another mutant construct has unit-cell parameters a = 77.4, b = 77.4, c = 136.9 A.