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最近、骨髄の原始造血前駆細胞に作用する幹細胞因子（SCF）と呼ばれる因子の同定、分離、および特性評価について説明しました。因子の可溶性形態は、ラット細胞株の条件付き培地から分離されました（Zsebo、K。M.、Wypych、J.、McNiece、I.K.、Lu、H。S.、Smith、K。A.、Karkare、S。B.、Sachdev、R。K.、Yuschenkoff、V。N.、Birkett、N.C.、Williams、L。R.、Satyagal、V。N.、Tung、W.、Bosselman、R。A.、Mendiaz、E。A.、およびLangley、K。E.（1990）Cell 63、195-201）およびラットとヒトCDNAはクローン化されています（Martinin、F。H.、Suggs、S。V.、Langley、K。E.、Lu、H.S.、Ting、J.、Okino、K。H.、Morris、C。F.、McNiece、I。K.、Jacobsen、F。W.、Mendiaz、E.A.、Birkett、N.C、Smith、K。M. J.、Parker、V.P.、Flores、J。C.、Patel、A.C.、Fisher、E.F.、Erjavec、H.O.、Herrera、C。J.、Wypych、J.、Sachdev、R.K.、Pope、J.A.、Leslie、I.、Wen、D.、Lin Lin、C.-H.、Cupples、R。L.、およびZsebo、K。M.（1990）Cell 63、203-211）。cDNAは、推定膜貫通ドメインを含む孤立した自然型で見つかったものにC末端をコードします。この論文では、大腸菌（非グリコシル化）および中国のハムスター卵巣（CHO）細胞（グリコシル化）から精製された組換えヒトSCFの可溶性型の構造特性について説明します。蛍光発光スペクトルは、単一のTRP残基が疎水性環境に存在することを示しています。循環二球菌と赤外線分光法は、アルファヘリックスとベータシートの両方を含むかなりの二次構造を示しています。沈降平衡による分子量測定は、分子が二量体（非共有関連）であることを示しており、ゲルろ過分析はこの結論と一致しています。CHO細胞由来のSCFは、N結合糖とOリンク糖の両方で、重量で約30％の炭水化物です。炭水化物の有無は、さまざまな構造分析の結果に影響しません。
最近、骨髄の原始造血前駆細胞に作用する幹細胞因子（SCF）と呼ばれる因子の同定、分離、および特性評価について説明しました。因子の可溶性形態は、ラット細胞株の条件付き培地から分離されました（Zsebo、K。M.、Wypych、J.、McNiece、I.K.、Lu、H。S.、Smith、K。A.、Karkare、S。B.、Sachdev、R。K.、Yuschenkoff、V。N.、Birkett、N.C.、Williams、L。R.、Satyagal、V。N.、Tung、W.、Bosselman、R。A.、Mendiaz、E。A.、およびLangley、K。E.（1990）Cell 63、195-201）およびラットとヒトCDNAはクローン化されています（Martinin、F。H.、Suggs、S。V.、Langley、K。E.、Lu、H.S.、Ting、J.、Okino、K。H.、Morris、C。F.、McNiece、I。K.、Jacobsen、F。W.、Mendiaz、E.A.、Birkett、N.C、Smith、K。M. J.、Parker、V.P.、Flores、J。C.、Patel、A.C.、Fisher、E.F.、Erjavec、H.O.、Herrera、C。J.、Wypych、J.、Sachdev、R.K.、Pope、J.A.、Leslie、I.、Wen、D.、Lin Lin、C.-H.、Cupples、R。L.、およびZsebo、K。M.（1990）Cell 63、203-211）。cDNAは、推定膜貫通ドメインを含む孤立した自然型で見つかったものにC末端をコードします。この論文では、大腸菌（非グリコシル化）および中国のハムスター卵巣（CHO）細胞（グリコシル化）から精製された組換えヒトSCFの可溶性型の構造特性について説明します。蛍光発光スペクトルは、単一のTRP残基が疎水性環境に存在することを示しています。循環二球菌と赤外線分光法は、アルファヘリックスとベータシートの両方を含むかなりの二次構造を示しています。沈降平衡による分子量測定は、分子が二量体（非共有関連）であることを示しており、ゲルろ過分析はこの結論と一致しています。CHO細胞由来のSCFは、N結合糖とOリンク糖の両方で、重量で約30％の炭水化物です。炭水化物の有無は、さまざまな構造分析の結果に影響しません。
We have recently described the identification, isolation, and characterization of a factor, termed stem cell factor (SCF), which acts on primitive hematopoietic progenitors of the marrow. A soluble form of the factor was isolated from the conditioned medium of a rat cell line (Zsebo, K. M., Wypych, J., McNiece, I. K., Lu, H. S., Smith, K. A., Karkare, S. B., Sachdev, R. K., Yuschenkoff, V. N., Birkett, N. C., Williams, L. R., Satyagal, V. N., Tung, W., Bosselman, R. A., Mendiaz, E. A., and Langley, K. E. (1990) Cell 63, 195-201) and rat and human cDNAs have been cloned (Martin, F. H., Suggs, S. V., Langley, K. E., Lu, H. S., Ting, J., Okino, K. H., Morris, C. F., McNiece, I. K., Jacobsen, F. W., Mendiaz, E. A., Birkett, N. C., Smith, K. A., Johnson, M. J., Parker, V. P., Flores, J. C., Patel, A. C., Fisher, E. F., Erjavec, H. O., Herrera, C. J., Wypych, J., Sachdev, R. K., Pope, J. A., Leslie, I., Wen, D., Lin, C.-H., Cupples, R. L., and Zsebo, K. M. (1990) Cell 63, 203-211). The cDNAs encode amino acids C-terminal to those found in the isolated natural form, including a putative transmembrane domain. This paper describes the structural characterization of soluble forms of recombinant human SCF purified from Escherichia coli (unglycosylated) and from Chinese hamster ovary (CHO) cells (glycosylated). Fluorescence emission spectra indicate that the single Trp residue is present in a hydrophobic environment. Circular dichroism and infrared spectroscopy indicate considerable secondary structure, including both alpha-helix and beta-sheet. Molecular weight determinations by sedimentation equilibrium show that the molecules are dimeric (noncovalently associated), and gel filtration analyses are consistent with this conclusion. The CHO cell-derived SCF is about 30% carbohydrate by weight, with both N-linked and O-linked sugar. The presence or absence of the carbohydrate does not influence the results of the various structural analyses.
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