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Experimental biology and medicine (Maywood, N.J.)2007Jan01Vol.232issue(1)

Tribulus terrestris lのサポニンは、多くの癌系統よりも正常なヒト線維芽細胞の場合は毒性が低い:アポトーシスと増殖への影響

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PMID:17202593DOI:
文献タイプ:
  • Comparative Study
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

この研究の目的は、正常なヒト皮膚線維芽細胞に対するTribulus Terrestris L.(TT)に由来するサポニンの影響を調査し、それを抗がん特性と比較することでした。この研究では、[3H]細胞増殖と生存率をそれぞれ評価するための[3H]チミジンの取り込みとMTT、および細胞内シグナル伝達経路を探求するための免疫ブロッティングとHPLC分析が使用されています。TTは、未処理のコントロールと比較して、処理された線維芽細胞のDNAへの[3H]チミジンの取り込みの用量依存性の減少を引き起こすことがわかりました。処理された細胞の生存率は、最大5つのマイクロG TT/ML培地の処理により、対照レベル内に残っていました。12.6マイクロG TT/mLの栽培培地で、> OR = 6 Micro G TT/ML培地でのインキュベーションで大幅に落ち込んでいた。ERK1/2は、リン酸化がわずかに回復した48時間までTTとの5分間のインキュベーションで有意に脱リン酸化されましたが、まだコントロールレベルを下回っていました。対照的に、p38とJNKのリン酸化がプラスの影響を受け、ピークはそれぞれ1時間と24時間のインキュベーションです。SAPK/MAPKのリン酸化/脱リン酸化イベントは、MKP-1誘導と明らかに相関していました。Procaspase 3は、5分間のインキュベーション後に活性化され、急速なアクチンの切断と一致しました。2分間の治療時に、プトレシン濃度の有意な減少と、スペルミジンとスペルミンの付随的な増加がありました。私たちの結果によると、TTは、以前の研究で調査した多くの癌系統と比較して、正常なヒト皮膚線維芽細胞に対して毒性が低くなっています。この細胞毒性の分子メカニズムには、ポリアミンの恒常性、増殖の抑制、およびアポトーシスの誘導の上方およびダウンレギュレーションが含まれます。動物モデルを使用したこの分野でのさらなる研究は、TTの潜在的な特性を抗がんサプリメントとして探求して解釈するのに役立ちます。

この研究の目的は、正常なヒト皮膚線維芽細胞に対するTribulus Terrestris L.(TT)に由来するサポニンの影響を調査し、それを抗がん特性と比較することでした。この研究では、[3H]細胞増殖と生存率をそれぞれ評価するための[3H]チミジンの取り込みとMTT、および細胞内シグナル伝達経路を探求するための免疫ブロッティングとHPLC分析が使用されています。TTは、未処理のコントロールと比較して、処理された線維芽細胞のDNAへの[3H]チミジンの取り込みの用量依存性の減少を引き起こすことがわかりました。処理された細胞の生存率は、最大5つのマイクロG TT/ML培地の処理により、対照レベル内に残っていました。12.6マイクロG TT/mLの栽培培地で、> OR = 6 Micro G TT/ML培地でのインキュベーションで大幅に落ち込んでいた。ERK1/2は、リン酸化がわずかに回復した48時間までTTとの5分間のインキュベーションで有意に脱リン酸化されましたが、まだコントロールレベルを下回っていました。対照的に、p38とJNKのリン酸化がプラスの影響を受け、ピークはそれぞれ1時間と24時間のインキュベーションです。SAPK/MAPKのリン酸化/脱リン酸化イベントは、MKP-1誘導と明らかに相関していました。Procaspase 3は、5分間のインキュベーション後に活性化され、急速なアクチンの切断と一致しました。2分間の治療時に、プトレシン濃度の有意な減少と、スペルミジンとスペルミンの付随的な増加がありました。私たちの結果によると、TTは、以前の研究で調査した多くの癌系統と比較して、正常なヒト皮膚線維芽細胞に対して毒性が低くなっています。この細胞毒性の分子メカニズムには、ポリアミンの恒常性、増殖の抑制、およびアポトーシスの誘導の上方およびダウンレギュレーションが含まれます。動物モデルを使用したこの分野でのさらなる研究は、TTの潜在的な特性を抗がんサプリメントとして探求して解釈するのに役立ちます。

The objective of the study was to explore the influence of saponins derived from Tribulus terrestris L. (TT) on normal human skin fibroblasts and to compare it with their anticancer properties. In this study, [3H]thymidine incorporation and MTT to assess cell proliferation and viability, respectively, and immunoblotting and HPLC analysis to explore intracellular signal transduction pathways have been used. We found that TT caused a dose-dependent decrease in [3H]thymidine incorporation into the DNA of treated fibroblast compared to the untreated controls. Viability of treated cells remained within the control levels with treatment of up to 5 micro g TT/ml medium. It was significantly depressed with incubation in > or =6 micro g TT/ml medium with an IC50 of 12.6 micro g TT/ml of cultivating media. ERK1/2 was significantly dephosphorylated at 5 mins of incubation with TT until the 48th hour, when phosphorylation slightly recovered, but was still below the control levels. In contrast, p38 and JNK phosphorylation was positively influenced, with peaks at 1 hr and 24 hrs of incubation respectively. Phosphorylation/dephosphorylation events of SAPK/MAPK clearly correlated with Mkp-1 induction. Procaspase 3 was activated after 5 mins of incubation and coincided with a rapid actin cleavage. There was a significant decrease of putrescine concentration and a concomitant increase of spermidine and spermine at 2 mins of treatment. According to our results, TT is less toxic for normal human skin fibroblasts in comparison to many cancer lines investigated in previous studies. The molecular mechanism of this cytotoxicity involves up- and downregulation of polyamines' homeostasis, suppression of proliferation, and induction of apoptosis. Further research in this field using animal models would help to explore and interpret the potential properties of TT as an anticancer supplement.

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