OCT-1のDNA-PKリン酸化部位は、DNA損傷後の細胞生存を促進します

Octamer転写因子-1（OCT-1）は最近、DNA損傷に続いて細胞生存を促進するストレスセンサーとして機能することが示されています。ここでは、イオン化放射線（IR）への曝露後のOCT-1によって与えられた生存シグナルが、N内の13種類のSer/THR残基のクラスターのDNA依存性プロテインキナーゼ（DNA-PK）依存性リン酸化に依存していることを示しています。- OCT-1の末端転写調節ドメイン。IR処理はヒストンH2BプロモーターへのOCT-1の動員に影響を与えませんでしたが、RNAポリメラーゼII、TATA結合タンパク質、ヒストンH4アセチル化の動員は強く減少し、IR後のOCT-1転写調節潜在性の減少と一致しています。暴露。OCT-1転写調節ドメインに存在する13の部位のSer/Thr-ALA置換は、IR曝露後のOCT-1リン酸化を排除しました。さらに、これらの置換により、OCT-1はIR処理されたOCT-1-/ - マウス胚芽球の生存を救うことを妨げ、DNA-PK依存性リン酸化とOCT-1の細胞生存への寄与との間の直接的なリンクを提供しました。これらの結果は、二本鎖DNA休憩によって活性化されるDNA-PK依存性細胞生存経路の主要なエフェクターとしてOCT-1を巻き込んでいます。

Octamer transcription factor-1 (Oct-1) has recently been shown to function as a stress sensor that promotes cell survival subsequent to DNA damage. Here, we show that the survival signal imparted by Oct-1 following exposure to ionizing radiation (IR) is dependent upon DNA-dependent protein kinase (DNA-PK)-dependent phosphorylation of a cluster of 13 specific ser/thr residues within the N-terminal transcriptional regulatory domain of Oct-1. Although IR treatment did not affect the recruitment of Oct-1 to the histone H2B promoter, the recruitment of RNA polymerase II, TATA-binding protein and histone H4 acetylation were strongly reduced, consistent with a decrease in Oct-1 transcriptional regulatory potential following IR exposure. Ser/Thr-Ala substitution of 13 sites present in Oct-1 transcriptional regulatory domain eliminated Oct-1 phosphorylation subsequent to IR exposure. Further, these substitutions prevented Oct-1 from rescuing the survival of IR-treated Oct-1-/- murine embryonic fibroblasts, providing a direct link between DNA-PK-dependent phosphorylation and the contribution of Oct-1 to cell survival. These results implicate Oct-1 as a primary effector in a DNA-PK-dependent cell survival pathway that is activated by double-stranded DNA breaks.