大腸菌の規制緩和株によるL-チロシン産生

芳香族アミノ酸L：-tyrosineの排泄は、野生型Escherichia coli K12の3つの遺伝子標的を操作することにより達成されました：フィードバック抑制耐性（FBR）誘導体は、AROGとTYRAの誘導体を低コピー番号ベクターで発現しました。TYRR遺伝子。このL：-tyrosine産生、株T1の生成は、芳香族アミノ酸生合成経路の規制緩和のみに基づいていましたが、ゲノムの構造遺伝子は影響を受けませんでした。前駆体基質の可能な制限を考慮して、2番目のチロシン過剰産生株である大腸菌T2が生成されました。2つの前駆体基質ホスホエノールピルビン酸およびエリスロース-4-リン酸の利用可能性を高めるために、PPSAおよびTKTA遺伝子は株T1バックグラウンドで過剰発現し、L：-tyrosine産生を50 mlバッチ培養で80％増加させました。FEDバッチ発酵により、L：-tyrosineの産生は細胞の成長と密接に相関しており、指数成長段階の終わりに最大の生産性を示していることが明らかになりました。最終L：-tyrosine濃度は、大腸菌T1では3.8 g/L、大腸菌T2では9.7 g/Lで、それぞれ0.037 g/g（T1）および0.102 g/g（T2）のグルコースあたりのL：-tyrosineが収率でした。

The excretion of the aromatic amino acid L: -tyrosine was achieved by manipulating three gene targets in the wild-type Escherichia coli K12: The feedback-inhibition-resistant (fbr) derivatives of aroG and tyrA were expressed on a low-copy-number vector, and the TyrR-mediated regulation of the aromatic amino acid biosynthesis was eliminated by deleting the tyrR gene. The generation of this L: -tyrosine producer, strain T1, was based only on the deregulation of the aromatic amino acid biosynthesis pathway, but no structural genes in the genome were affected. A second tyrosine over-producing strain, E. coli T2, was generated considering the possible limitation of precursor substrates. To enhance the availability of the two precursor substrates phosphoenolpyruvate and erythrose-4-phosphate, the ppsA and the tktA genes were over-expressed in the strain T1 background, increasing L: -tyrosine production by 80% in 50-ml batch cultures. Fed-batch fermentations revealed that L: -tyrosine production was tightly correlated with cell growth, exhibiting the maximum productivity at the end of the exponential growth phase. The final L: -tyrosine concentrations were 3.8 g/l for E. coli T1 and 9.7 g/l for E. coli T2 with a yield of L: -tyrosine per glucose of 0.037 g/g (T1) and 0.102 g/g (T2), respectively.