alphaiibbeta3のHPA-1多型は、ビトロの流れシステムで固定化されたフィブリノゲンに血小板接着を調節します

背景：血管損傷の部位にある内皮下マトリックス上の血小板接着とその後の血栓形成は、心的外傷後出血の停止において重要な役割を果たしますが、急性冠症候群や脳卒中などのさまざまな病理学的血栓症イベントでも重要な役割を果たします。最近公開された研究は、血小板統合alphaiibbeta3が内皮損傷の部位での閉塞性血栓形成に密接に関与していることを明確に実証しています。したがって、この受容体の発現における遺伝的変異は、過度の出血または過度の血栓形成につながる可能性があります。この研究では、血流をシミュレートするin vitroシステムを使用して、固定化フィブリノーゲンへの血小板接着に対するインテグリンアルファイブベタ3のHPA-1多型の影響を評価しました。 方法：抗凝固した全血[49の以前に遺伝子型の血液供与体49）の血小板を蛍光染料で標識し、長方形の流量チャンバー（50秒（-1）、500秒（-1）および1500秒のせん断速度（-1）で灌流しました。））。灌流の開始後15秒および5分後の血小板接着の視覚化と定量化には、蛍光レーザースキャン顕微鏡を使用しました。 結果：灌流中に、血小板接着は、博覧会の時間とせん断速度に関して直線的に増加しました。フィブリノーゲンでコーティングされたカバースリップ上でアブシキシマブでプレインキュベートした血液の灌流は、血小板接着の減少を示しました（絶対蛍光：168 +/- 35 U対対照実験で53000 +/- 19000、P <0.05）、ならびにBSA上の灌流による- コーティングされたガラスカバースリップ。HPA-1A/1A遺伝子型を含む血小板は、初期のより良い接着を示しましたが、HPA-1B/1B血小板と比較して、動脈流条件下でより高い剥離を示しました。安定した接着速度の分析は、HPA-1B/1B遺伝子型を運ぶ血小板がフィブリノゲンとの初期相互作用の反応性閾値が高いことを示していますが、（灌流の時間に関して）より高いせん断速度の下では、血小板よりもフィブリノーゲンとのより安定した結合が認識されています。HPA-1A/1A遺伝子型で。 結論：我々のデータは、血小板インテグリンの遺伝的に決定されたバリアントalphaiibbeta3が動脈血栓形成に役割を果たす可能性があるという主張を支持し、したがって疫学研究から導出された仮説を確認します。

BACKGROUND: Platelet adhesion and subsequent thrombus formation on a subendothelial matrix at the site of vascular damage play a crucial role in the arrest of posttraumatic bleeding but also in different pathological thrombotic events, such as acute coronary syndrome and stroke. Recently published studies have clearly demonstrated that platelet integri alphaIIbbeta3 is intimately involved in the occlusive thrombus formation at the site of endothelial damage. Therefore, any genetic variation in the expression of this receptor may lead to an excessive bleeding or excessive thrombus formation. In this study, we evaluated the influence of HPA-1 polymorphism of integrin alphaIIbbeta3 on platelet adhesion onto immobilized fibrinogen using an in vitro system simulating blood flow. METHODS: Platelets in anticoagulated whole blood [49 healthy previously genotyped blood donors) were labelled with fluorescence dye and perfused through a rectangular flow chamber (shear rates of 50 s(-1), 500 s(-1) and 1500 s(-1)). A fluorescence laser-scan microscope was used for visualisation and quantification of platelet adhesion at 15 sec, 1 and 5 minutes after start of perfusion. RESULTS: During perfusion, the platelet adhesion linearly increased with regard to exposition time and shear rate. Perfusion of blood preincubated with Abciximab over fibrinogen-coated cover-slips showed reduced platelet adherence (absolute fluorescence: 168 +/- 35 U vs. 53000 +/- 19000 at control experiments, p < 0.05), as well as by perfusion over BSA-coated glass coverslips. Platelet with HPA-1a/1a genotype exhibited initial better adhesion but they also exhibited higher detachment under arterial flow conditions compared to the HPA-1b/1b platelets. Analysis of stable adhesion rate indicate that the platelets carrying the HPA-1b/1b genotype have a higher reactivity threshold for initial interaction with fibrinogen but under the higher shear rate (in regard to time of perfusion) also realize more stable bonds with fibrinogen than platelets with the HPA-1a/1a genotype. CONCLUSION: Our data support the contention that genetically determined variants of platelet integrins alphaIIbbeta3 could play a role in arterial thrombogenesis and thus confirm the hypothesis derived from epidemiological studies.