CACO-2単層モデルにおける緑茶カテキンの腸の流出輸送速度論

エピガロカテキン腹岩（EGCG）、エピガロカテキン（EGC）、エピカテキン勇敢（ECG）、エピカテキン（EC）を含む緑茶カテキン（GTCS）のバイオアベイラビリティは、動物と人間の両方で低くなっています。この低生物学的利用能への腸の流出の寄与は、以前の研究によって示唆されています。本研究の目的は、CACO-2細胞株における4つの主要なGTCの流出輸送の速度論を調査し、各GTC間の排出輸送に関する比較を提供することでした。CACO-2細胞単層モデルを使用して、15〜265 microMの範囲の濃度での各GTCの基底から典型的な輸送を調べました。輸送量のGTCは、電気化学検出を伴う高性能液体クロマトグラフィーによって測定されました。運動パラメーター、V（max）、k（m）、v（max）/k（m）が決定され、4つの研究されたGTCの間で比較されました。基底から典型的な輸送の程度は、下降順序で、EC> EGC> ECGほぼEGCGでした。速度論的研究では、ECの活性および飽和流出輸送がCACO-2細胞で行われ、131 microM、0.0249 nmol min cm（-2）、および固有のクリアランス（V（最大）があります（V（V）が示されました（V（0.19ミクロルmin cm（-2）の最大）/k（m）。約200 microMの濃度であっても、EGC、ECG、およびEGCGの排出輸送では飽和は観察されませんでした。結論として、CACO-2細胞におけるGTCの排出輸送の程度は、下降順に、EC> EGC> ECGのほぼEGCGであり、これは腸内で発生する除去の順序を反映する可能性があります。速度論的研究は、ECの基礎から典型的な輸送における流出輸送体の重要性を示し、ECの限られた経口バイオアベイラビリティにおける彼らの役割を示唆しています。

The bioavailability of green tea catechins (GTCs), including epigallocatechin gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC), epicatechin gallate (ECG) and epicatechin (EC) is low in both animals and humans. The contribution of intestinal efflux to this low bioavailability has been suggested by previous studies. The objective of the present study was to investigate the kinetics of efflux transport of the four major GTCs in Caco-2 cell lines, to provide comparison on the efflux transport between each GTC. The basal-to-apical transport of each GTC at concentrations ranging from 15 to 265 microM was examined using the Caco-2 cell monolayer model. Transported amount of GTC was measured by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection. Kinetic parameters, V(max), K(m) and V(max)/K(m) were determined and compared among the four studied GTCs. The extent of basal-to-apical transport was, in descending order, EC > EGC > ECG approximately EGCG. Kinetic studies indicated that active and saturable efflux transport of EC took place in Caco-2 cells, with a K(m) of 131 microM, a V(max) of 0.0249 nmol min cm(-2) and an intrinsic clearance (V(max)/K(m)) of 0.19 microL min cm(-2). No saturation could be observed for the efflux transport of EGC, ECG and EGCG even at concentrations up to about 200 microM, which may be due to their low affinity towards the transporters at the concentration range studied. In conclusion, the extent of efflux transport of GTCs in Caco-2 cells was, in descending order, EC > EGC > ECG approximately EGCG, which may reflect the order of elimination occurring in the intestine. The kinetic studies showed the importance of efflux transporters in basal-to-apical transport of EC and suggests their role in the limited oral bioavailability of EC.