ペプトストラプトコッカスからのタンパク質Lは、カッパライトチェーン変数ドメインに結合します

タンパク質Lは、嫌気性細菌種ペプトストラプトコッカスマグナスのいくつかの株によって発現する免疫グロブリン軽鎖結合タンパク質です。ヒトカッパおよびラムダ光鎖の主要な可変領域サブグループは、タンパク質L結合についてテストされました。VカッパI、VカッパIII、およびVカッパIV結合タンパク質Lは、V Kappa IIサブグループのタンパク質またはLambda Light Chainサブグループで結合は発生しませんでした。自然に発生するVLフラグメントのタンパク質L結合能力、およびカッパIライトチェーンから調製されたVLおよびCL関連のトリプシン由来およびペプシン由来のペプチドの研究により、相互作用の部位がVLドメインに局在しました。分離されたVカッパIフラグメントへの結合の親和性定数は、天然タンパク質のそれに匹敵しました（Ka 0.9 x 10（9）M-1およびKa 1.5 x 10（9）M-1）。CL関連のフラグメントでは結合は発生しませんでした。Vカッパフラグメントまたはネイティブカッパ鎖の広範な還元とアルキル化により、タンパク質L結合が完全に失われました。比較アミノ酸配列データから、カッパI、カッパIII、およびカッパIVタンパク質によるタンパク質Lの選択的結合を説明する特定のVLフレームワーク領域残基を特定することは可能ですが、我々の研究は、この相互作用が本質的に依存していることを示しています。カッパチェーンVLドメインの三次構造的完全性について。

Protein L is an immunoglobulin light chain-binding protein expressed by some strains of the anaerobic bacterial species Peptostreptococcus magnus. The major variable region subgroups of human kappa and lambda light chains were tested for protein L binding; V kappa I, V kappa III, and V kappa IV bound protein L, whereas no binding occurred with proteins of the V kappa II subgroup or with any lambda light chain subgroups. Studies of the protein L binding capacity of naturally occurring VL fragments, and VL- and CL-related trypsin- and pepsin-derived peptides prepared from a kappa I light chain, localized the site of interaction to the VL domain. The affinity constant for the binding to an isolated V kappa I fragment was comparable to that for the native protein (Ka 0.9 x 10(9) M-1 and Ka 1.5 x 10(9) M-1, respectively). No binding occurred with CL-related fragments. Extensive reduction and alkylation of the V kappa fragment or the native kappa chain resulted in complete loss of protein L binding. Although it is possible, from comparative amino acid sequence data, to identify certain VL-framework region residues that account for the selective binding of protein L by kappa I, kappa III, and kappa IV proteins, our studies indicate that this interaction is essentially dependent upon the tertiary structural integrity of the kappa chain VL domain.