ヌードマウスの肝臓に自然に転移する新規ヒト結腸直腸癌細胞株（CLY）の確​​立と特性評価

肝臓転移を伴う結腸直腸癌（CRC）は、急速な進行と患者の転帰不良を伴う致命的な疾患です。しかし、CRCの肝臓転移に関与する分子メカニズムは、主に肝臓転移起源とヌードマウスの自発的な転移ポテンシャルを備えた利用可能なCRC細胞株のほとんどが存在するため、本質的に不明のままです。この研究では、64歳の中国のCRC患者の肝転移に由来する新規転移CRC細胞株であるClyを確立しました。細胞株は、形態、成長速度論、腫瘍形成性、自然肝転移の可能性、および細胞遺伝学によって特徴付けられました。E-カドヘリン遺伝子（CDH1）プロモーターのベータカテニンおよびE-カドヘリンおよびメチル化特異的PCR（MSP）の免疫蛍光分析も、CLYと従来のCRC細胞株（HT-29およびLOVO）と比較するために使用されました。Clyはin vitroでコンパクトおよび多角形の上皮細胞を示し、その集団の倍増時間は29.5時間でした。ヌードマウスへのClyの皮下移植は、10ヌードマウスのすべてに皮下腫瘍形成と自然肝転移をもたらしました。細胞遺伝学的分析では、免疫蛍光分析では、モード染色体数60のモード染色体数を持つ異数性核型が同定されました。したがって、CLYは、CRCの転移メカニズムをさらに調査し、肝臓転移を伴うCRCの新しい治療試薬をテストするための理想的な細胞モデルです。

Colorectal cancer (CRC) with liver metastasis is a fatal disease with rapid progression and poor patient outcome. However, the molecular mechanism involved in liver metastasis of CRC remains essentially unknown, largely because of the presence of few available CRC cell lines with liver metastasis origin and spontaneous metastatic potentials in nude mice. In this study, we established a novel metastatic CRC cell line, CLY, derived from liver metastasis of a 64-year-old Chinese CRC patient. The cell line was characterized by morphology, growth kinetics, tumorigenicity, spontaneous liver metastatic potential, and cytogenetics. Immunofluorescence analysis of beta-catenin and E-cadherin and methylation-specific PCR (MSP) of the E-cadherin gene (CDH1) promoter were also used to compare CLY with conventional CRC cell lines (HT-29 and Lovo). CLY exhibited compact and polygonal-shaped epithelial cells in vitro and its population doubling time was 29.5 h. Subcutaneous transplantation of CLY into nude mice resulted in subcutaneous tumor formation and spontaneous liver metastasis in all of 10 nude mice. Cytogenetic analysis identified aneuploidy karyotypes with a modal chromosome number of 60. In immunofluorescence analysis, CLY exhibited a low expression but high restricted nuclear localization of beta-catenin and a silenced expression of E-cadherin, which may be induced by hypermethylation of the E-cadherin gene (CDH1) promoter and differed from conventional CRC cell lines. Therefore, CLY is an ideal cell model for further exploring the metastatic mechanisms of CRC and testing new therapeutic reagents for CRC with liver metastasis.