細菌プレートアッセイと電気化学的手法：MDMAのカテコールチオエーテル代謝産物（「エクスタシー」）の酸素サイクリングを介して毒性効果を誘導する能力を評価するための効率的なタンデム

MDMA（エクスタシー）のいくつかのカテコールチオエーテル代謝産物、3つの単層、5-（グルタチオン-S-イル）-N-メチル - メチルドパミン（1）、5-（n-アセチルシュタイン-S-イル）-N-メチル-alpha-Methyldopamine（2）、および5-（Cystein-S-Ill）-N-Methyl-Methyldopamine（3）、および2つのBi-Aducts、2,5-Bis（グルタチオン-S-Ill）-n - メチル - アルファメチルドパミン（4）および2,5-ビス（n-アセチルシュタイン-S-イル）-N-メチル - アルファメチルドパミン（5）は、環境に優しいワンポット電気化学処置を通じて合成されました。それらの細胞毒性プロファイルは、単純な大腸菌プレートアッセイを使用してさらに特徴付けられ、N-メチル - アルファ - メチルドパミン（HHMA）、ドーパミン（DA）、および対応するカテコールチオエーテルコンジュゲート（単産物6-8および双等層9類9のプロファイルと比較して特徴付けられました。および10）。反応性酸素種（ROS-tox）によって媒介される毒性は、オキシルアッセイで検出され、オキシルタンパク質の欠乏による酸化ストレスに敏感な細胞を使用しました。キノンの内因性求核剤（Q-tox）に対する高感受性から生じる毒性は、チロシナーゼの存在下でOxyr+細胞を使用して検出され、対応するOキノンへのカテコール酸化を促進しました。毒性を欠いた5-（システイン-S-Ill）モノジュゲート3を除外したとき、すべての化合物はチロシナーゼの存在下で増強されたROS-Toxを産生し、生成されたOキノン（またはo-Quinone-thioether）種は、そのセミキノンラジカルを介して酸化還元サイクルに入り、ROSの形成につながる可能性があります。毒性のシーケンス順序はHHMA約= 1約2 = 2 = 5 >> 7> da約4> 10> 10> 6> 8でした。チロシナーゼの存在下でも。最後に、いくつかの異なる経路が全体的なMDMA毒性に寄与する可能性があり、HHMAとカテコールチオエーテル1-5がMDMAのin vivo毒性代謝産物として間違いなく確立されていないことを考慮して、これらの化合物が関与する可能性があることが示唆されます。ROSを生成する酸化還元活性キノイド中心の効率によるこの薬の毒性効果。

Several catechol-thioether metabolites of MDMA (ecstasy), three monoadducts, 5-(glutathion-S-yl)-N-methyl-alpha-methyldopamine (1), 5-(N-acetylcystein-S-yl)-N-methyl-alpha-methyldopamine (2), and 5-(cystein-S-yl)-N-methyl-alpha-methyldopamine (3), and two bi-adducts, 2,5-bis(glutathion-S-yl)-N-methyl-alpha-methyldopamine (4) and 2,5-bis(N-acetylcystein-S-yl)-N-methyl-alpha-methyldopamine (5), have been synthesized through an environmentally friendly one-pot electrochemical procedure. Their cytotoxicity profiles were further characterized using simple Escherichia coli plate assays and compared with those of N-methyl-alpha-methyldopamine (HHMA), dopamine (DA), and its corresponding catechol-thioether conjugates (monoadducts 6-8 and bi-adducts 9 and 10). Toxicity mediated by reactive oxygen species (ROS-TOX) was detected in the OxyR- assay, using cells sensitive to oxidative stress due to a deficiency in the OxyR protein. Toxicity arising from the high susceptibility of quinone toward endogenous nucleophiles (Q-TOX) was detected using OxyR+ cells, in the presence of tyrosinase, to promote catechol oxidation to the corresponding o-quinone. At the exclusion of 5-(cystein-S-yl) mono-conjugate 3, which was devoid of any toxicity, all compounds produced ROS-TOX, which was enhanced in the presence of tyrosinase, suggesting that the generated o-quinone (or o-quinone-thioether) species can enter redox cycles through its semiquinone radical, leading to the formation of ROS. The sequence order of toxicity was HHMA approximately = 1 approximately = 2 approximately =5 >> 7 > DA approximately = 4 > 10 > 6 > 8. In contrast, no Q-TOX arising from the binding of quinones with cellular nucleophiles was evidenced, even in the presence of tyrosinase. Finally, taking into account that several different pathways could contribute to the overall MDMA toxicity and that HHMA and catechol-thioether conjugates 1-5 have not been undoubtedly established as in vivo toxic metabolites of MDMA, it can be suggested that these compounds could participate in the toxic effects of this drug through the efficiency of redox active quinonoid centers generating ROS.