前駆細胞および幹細胞の免疫媒介骨髄不全症候群：細胞毒性T細胞クローンの分子分析

T細胞受容体（TCR）のユニークな構造は、個々のT細胞クローンの分子同定を可能にし、TCR CDR3領域などを使用した再配置されたTCR鎖の構造に基づいて、分子診断テストの設計のユニークな機会を提供します。当初、T細胞の大顆粒リンパ球性白血病（T-LGL）、粘膜粘液性機能性機能性リンパ腫、および末梢T細胞リンパ腫を含むクローンT細胞悪性腫瘍は、Y-チェイネーを使用したT-Gamma再配置によるクローン性の検出などのTCRベースの分析アッセイの標的でした。 - 特異的PCRまたはサザンブロット。これらの障害の研究は、ポリクローナルT細胞媒介疾患の調査に対するTCR分析の合理的な方法のさらなる分析概念と適用を促進しました。血液学では、そのような状態には、移植片対宿主疾患（GVHD）および免疫媒介骨髄不全症候群が含まれます。非形質性貧血（AA）では、骨髄異形成症候群（MDS）または発作性夜間症候群（PNH）では、細胞毒性T細胞応答は、単一系統系の細胞質における茎またはより系統制限された前駆細胞にある特定の抗原に対して指示される場合があります。ポリクローナルCTL応答を促進する抗原標的の性質は不明のままです。TCRレパートリー分析の新しい方法には、VBフローサイトメトリー、ペプチド特異的テトラマー染色、in vitro刺激アッセイ、TCR CDR3特異的PCRが含まれます。このようなPCRアッセイは、すべてのVBファミリに対してVBファミリ固有または多重化される可能性があります。増幅された製品は、最も免疫優性クロノタイプの検出を容易にするために特徴付けられ、定量化できます。このようなクロノタイプは、グローバルポリクローナルT細胞応答のマーカーとして機能する可能性があります。これらのクロノタイプの識別は、さまざまな方法で血液および組織生検で行うことができます。病原性CTLクローンに対応する免疫優性クロノタイプが特定されると、病態生理学的プロセスの活性の代理マーカーとして機能するか、特定の抗原の存在を示すことさえできます。個々のクロノタイプの関連性は、疾患の活性との臨床的相関から確認できます。免疫抑制療法のモニタリングと再発の予測には、複数のCDR3クローンの配列決定などの定量的クロノタイプアッセイを適用できます。将来の技術により、クロノタイプのマイクロアレイまたはクロノタイプの診断の他のより臨床的に適用可能な方法の設計が可能になる場合があります。同様に、免疫ドミナントクロノタイプの同定は、ワクチン接種と抗イドイオタイプ応答の誘導を伴う自己免疫または悪性クローンの標的化を促進する可能性があります。

The unique structure of the T cell receptor (TCR) enables molecular identification of individual T cell clones and provides an unique opportunity for the design of molecular diagnostic tests based on the structure of the rearranged TCR chain e.g., using the TCR CDR3 region. Initially, clonal T cell malignancies, including T cell large granular lymphocyte leukemia (T-LGL), mucosis fungoides and peripheral T cell lymphoma were targets for the TCR-based analytic assays such as detection of clonality by T-gamma rearrangement using y-chain-specific PCR or Southern Blotting. Study of these disorders facilitated further analytic concepts and application of rational methods of TCR analysis to investigations of polyclonal T cell-mediated diseases. In hematology, such conditions include graft versus host disease (GvHD) and immune-mediated bone marrow failure syndromes. In aplastic anemia (AA), myelodysplastic syndrome (MDS) or paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH), cytotoxic T cell responses may be directed against certain antigens located on stem or more lineage-restricted progenitor cells in single lineage cytopenias. The nature of the antigenic targets driving polyclonal CTL responses remains unclear. Novel methods of TCR repertoire analysis, include VB flow cytometry, peptide-specific tetramer staining, in vitro stimulation assays and TCR CDR3-specific PCR. Such PCR assay can be either VB family-specific or multiplexed for all VB families. Amplified products can be characterized and quantitated to facilitate detection of the most immunodominant clonotypes. Such clonotypes may serve as markers for the global polyclonal T cell response. Identification of these clonotypes can be performed in blood and tissue biopsy material by various methods. Once immunodominant clonotypes corresponding to pathogenic CTL clones are identified they can serve as surrogate markers for the activity of the pathophysiologic process or even indicate the presence of specific antigens. The relevance of the individual clonotypes can be ascertained from clinical correlations with the activity of the disease. Quantitative clonotypic assays such as sequencing of multiple CDR3 clones or clonotypic Taqman PCR can be applied for the monitoring of the immunosuppressive therapy and prediction of relapse. Future technologies may allow for the design of clonotypic microarrays or other more clinically applicable methods of clonotypic diagnostics. Similarly, identification of immunodominant clonotypes may facilitate targeting of autoimmune or malignant clones with vaccination and induction of anti-idiotypic responses.