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Nature protocols20070101Vol.2issue(2)

In vitro スクラッチアッセイ: in vitro での細胞遊走を分析するための便利で安価な方法

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, N.I.H., Extramural
概要
Abstract

in vitroスクラッチアッセイは、in vitroでの細胞移動を測定するための簡単で低コストでよく発達した方法です。基本的な手順には、セル単層に「スクラッチ」を作成し、セルの移動中に最初と定期的に画像をキャプチャしてスクラッチを閉じ、画像を比較してセルの移動速度を定量化します。他の方法と比較して、in vitroスクラッチアッセイは、細胞マトリックスと細胞間相互作用が細胞移動に及ぼす影響に関する研究に特に適しています。必要に応じて細胞内イベントを監視します。均質な細胞集団の移動を監視することに加えて、この方法は、スクラッチの先端における個々の細胞の移動を測定するために採用されています。細胞のトランスフェクションの時間を考慮していないため、in vitroスクラッチアッセイ自体は通常、数時間から一晩までかかります。

in vitroスクラッチアッセイは、in vitroでの細胞移動を測定するための簡単で低コストでよく発達した方法です。基本的な手順には、セル単層に「スクラッチ」を作成し、セルの移動中に最初と定期的に画像をキャプチャしてスクラッチを閉じ、画像を比較してセルの移動速度を定量化します。他の方法と比較して、in vitroスクラッチアッセイは、細胞マトリックスと細胞間相互作用が細胞移動に及ぼす影響に関する研究に特に適しています。必要に応じて細胞内イベントを監視します。均質な細胞集団の移動を監視することに加えて、この方法は、スクラッチの先端における個々の細胞の移動を測定するために採用されています。細胞のトランスフェクションの時間を考慮していないため、in vitroスクラッチアッセイ自体は通常、数時間から一晩までかかります。

The in vitro scratch assay is an easy, low-cost and well-developed method to measure cell migration in vitro. The basic steps involve creating a "scratch" in a cell monolayer, capturing the images at the beginning and at regular intervals during cell migration to close the scratch, and comparing the images to quantify the migration rate of the cells. Compared to other methods, the in vitro scratch assay is particularly suitable for studies on the effects of cell-matrix and cell-cell interactions on cell migration, mimic cell migration during wound healing in vivo and are compatible with imaging of live cells during migration to monitor intracellular events if desired. Besides monitoring migration of homogenous cell populations, this method has also been adopted to measure migration of individual cells in the leading edge of the scratch. Not taking into account the time for transfection of cells, in vitro scratch assay per se usually takes from several hours to overnight.

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