ショウジョウバエCTLA-2様タンパク質（D/CTLA-2）は、カテプシンL様酵素であるシステインプロテイナーゼ1（CP1）を阻害します。

この研究では、プロプロペプチド様システインプロテイナーゼ阻害剤であるショウジョウバエCTLA-2様タンパク質（D/CTLA-2）、CG10460（CRAMMER）遺伝子産物を提示します。プロテイナーゼ1（CP1）。大腸菌で発現した組換えD/CTLA-2は、4.7 nmのKI値でBombyxシステインプロテイナーゼ（BCP）を強く阻害しました。また、それぞれ3.9（ヒト肝臓）および0.43（ウサギ肝臓）nm、7.8 nm（ヒト肝臓）のKi値でカテプシンLとHを阻害しました。組換えD/CTLA-2は、15 nm（ヒト肝臓）および110 nm（ラット肝臓）のKI値でカテプシンBに対して低いが有意な阻害活性を示しましたが、パパインはほとんど阻害されませんでした。成人のショウジョウバエの総体からD/CTLA-2によって阻害されたシステインプロテイナーゼを精製しようとしました。組換えD/CTLA-2は、12 nMのKI値でCP1を有意に阻害し、D/CTLA-2の同族酵素であるCP1がショウジョウバエ細胞の阻害剤の標的酵素であることを示しています。これらの結果は、D/CTLA-2が、Bombyxシステインプロテイナーゼ阻害剤（BCPI）や細胞毒性T-リンフ胞子菌抗ジテン-2（CTLA-2（CTLA-2）などの他のプロペプチド様システインプロテイナーゼ阻害剤と同様のカテプシンL様システインプロテイナーゼの選択的阻害剤であることを示しています。）。D/CTLA-2は、ショウジョウバエのライフサイクル全体にわたって発現しました。胚発生の後期段階で、ガーランド細胞および腹腔腺で強い発現が観察されました。これらの結果は、CP1の制御されていない酵素活性を抑制することにより、これらの組織の機能内および細胞外消化プロセスに関与するD/CTLA-2がこれらの組織に関与していることを示唆しています。

In this study, we present a propeptide-like cysteine proteinase inhibitor, Drosophila CTLA-2-like protein (D/CTLA-2), a CG10460 (crammer) gene product, with an amino acid sequence significantly similar to the proregion of Drosophila cysteine proteinase 1 (CP1). Recombinant D/CTLA-2, expressed in E. coli, strongly inhibited Bombyx cysteine proteinase (BCP) with a Ki value of 4.7 nM. It also inhibited cathepsins L and H with Ki values of 3.9 (human liver) and 0.43 (rabbit liver) nM, and 7.8 nM (human liver), respectively. Recombinant D/CTLA-2 exhibited low but significant inhibitory activities to cathepsin B with Ki values of 15 nM (human liver) and 110 nM (rat liver), but hardly inhibited papain. We attempted to purify cysteine proteinases inhibited by D/CTLA-2 from total bodies of adult Drosophila. Recombinant D/CTLA-2 significantly inhibited CP1 with a Ki value of 12 nM, indicating that CP1, a cognate enzyme of D/CTLA-2, is a target enzyme of the inhibitor in Drosophila cells. These results indicate that D/CTLA-2 is a selective inhibitor of cathepsin L-like cysteine proteinases similar to other propeptide-like cysteine proteinase inhibitors such as Bombyx cysteine proteinase inhibitors (BCPI) and cytotoxic T-lymphocyte antigen-2 (CTLA-2). D/CTLA-2 was expressed over the whole life cycle of Drosophila. Strong expression was observed in the garland cells and prothoracic gland in the late stages of embryonic development. These results suggest that D/CTLA-2, implicated in intra- and extra-cellular digestive processes, functions in these tissues by suppressing uncontrolled enzymatic activities of CP1.