Runx2転写因子は、YES関連タンパク質YAP65と協力して、細胞形質転換を促進します

RUNTボックスドメインDNA結合転写因子（RUNX）は、造血、骨、および胃の発達において重要な役割を果たします。これらの要因は、血管新生と腫瘍形成イベントを調節し、標的遺伝子の活性化因子または抑制者のいずれかとして機能します。Runx2は必須の骨成熟因子ですが、おそらく特定のコアクチベーターまたはコアプッラー因子と関連することにより、in vitroでのin vivoおよび細胞増殖の形質転換を促進することもわかっています。Adenoviralを介したドミナント陰性Runx2の過剰発現またはRNAインターフェレーションによるRunx2の特異的減少は、細胞増殖を阻害します。Runx2が細胞形質転換にも役割を果たすかどうかを判断するために、Coactivator Yes関連タンパク質（YAP65）とのRunx2相互作用を調べました。C末端ドメイン（PPPY）のプロリンリッチセグメントを介してYAP65に関連付けられ、Runx2とYAP65の共発現により、各因子のみに比べて焦点形成とアンカレッジに依存しない成長が大幅に増加しました。ただし、野生型RUNX2とは対照的に、YAP65に結合しない変異体RUNX2（P409A）は、YAP65と協力してアンカレッジに依存しない成長を促進しませんでした。RUNX2は、細胞形質転換を媒介することが知られているサイクリン依存性キナーゼ阻害剤P21（CIP1）の強力なリプレッサーです。YAP65の過剰発現により、細胞変換を促進しながらP21（CIP1）タンパク質発現のRunx2依存性ダウンレギュレーションが妨げられました。RUNX2（P409A）変異体は、DNAを結合し、DNA沈殿とルシフェラーゼレポーターアッセイによって示されるようにP21（CIP1）プロモーターを抑制する能力を保持しましたが、P21（CIP1）プロモーターの抑制を緩和することはできませんでした。したがって、これらの結果は、P21（CIP1）タンパク質発現の変調によって媒介される可能性のある発癌性変換におけるRunx2およびYAP65相互作用の新しい機能を明らかにしています。

The Runt box domain DNA-binding transcription factors (RUNX) play key roles in hematopoietic, bone, and gastric development. These factors regulate angiogenesis and tumorigenic events, functioning as either activators or repressors of target genes. Although RUNX2 is an essential bone maturation factor, it has also been found to promote transformation in vivo and cell proliferation in vitro, perhaps by associating with specific coactivators or corepressors. Adenoviral-mediated overexpression of dominant negative RUNX2 or specific reduction of RUNX2 with RNA-interference inhibits cell proliferation. To determine whether RUNX2 also plays a role in cell transformation, RUNX2 interactions with the coactivator Yes-associated protein (YAP65) were examined. RUNX2 associated with YAP65 via a proline-rich segment in the C-terminal domain (PPPY) and coexpression of RUNX2 and YAP65 significantly increased foci formation and anchorage-independent growth relative to each factor alone. However, in contrast to wild-type RUNX2, a mutant RUNX2(P409A), which does not bind YAP65, did not cooperate with YAP65 to promote anchorage-independent growth. RUNX2 is a strong repressor of the cyclin-dependent kinase inhibitor p21(CIP1), which is known to mediate cell transformation. Overexpression of YAP65 prevented RUNX2-dependent downregulation of p21(CIP1) protein expression while promoting cell transformation. The RUNX2(P409A) mutant retained the ability to bind DNA and repress the p21(CIP1) promoter as shown by DNA precipitation and luciferase-reporter assays, respectively, but was not able to relieve repression of the p21(CIP1) promoter. Therefore, these results reveal a novel function of the RUNX2 and YAP65 interaction in oncogenic transformation that may be mediated by modulation of p21(CIP1) protein expression.