癌の養子免疫療法のためのエフェクターT細胞の4-1BB共刺激：BCL遺伝子ファミリーの関与

以前に、CD3およびCD28の関与に加えて、マウスMCA 205腫瘍誘発リンパ節（TDLN）細胞が3番目のシグナル、4-1BB（CD137）を介してin vitro共刺激を行うと、T細胞収量が大幅に増加し、抗腫瘍応答が抗腫瘍反応を増幅することが報告されました。養子療法。T細胞収率の増加は、活性化誘導細胞死の阻害に関連しているように見えました。この研究では、実際の時間ポリメラーゼ連鎖反応と細胞内染色を使用して、抗アポトーシスBcl遺伝子メンバーが4〜1bbの結晶TDLN細胞で調節されるという仮説をテストしました。CD3/CD28と組み合わせて4-1bbを介して活性化されたTDLN細胞は、CD3/CD28の活性化と比較して、Bcl-2およびBcl-XL遺伝子およびタンパク質発現の上昇を示しました。さらに、Bcl-2および/またはBcl-XL阻害は、TDLN細胞における活性化誘導細胞死の4-1BBが受ける救助を廃止し、その結果、4-1BB強化されたTDLN細胞収量が廃止されました。CHENICマウスは、CFSEで標識されたTDLN細胞のドナーとして使用され、静脈内養子縁組後の活性化細胞の増殖と持続性を評価しました。移動した細胞のエフェクター機能は、細胞内サイトカイン染色を使用して処理されたマウスから描かれた連続血液サンプルの腫瘍刺激に応答したインターフェロンガンマ生産細胞の発生率を決定することにより評価されました。CD28およびCD28/4-1BBの共刺激は、CD3の活性化と比較して、in vivoの増殖と注入細胞の生存期間で大幅に増強されました。4-1BBのコラゲーションにより、CD3およびCD3/CD28活性化細胞の両方と比較して、注入細胞の増殖とエフェクター機能が増強されました。T細胞活性化経路に関与するシグナル伝達分子の機能を特徴付けると、癌免疫療法のエフェクターT細胞の生成の条件の最適化が可能になる場合があります。

We previously reported that in vitro costimulation of murine MCA 205 tumor-draining lymph node (TDLN) cells through a third signal, 4-1BB (CD137), in addition to CD3 and CD28 engagement significantly increases T-cell yield and amplifies antitumor responses in adoptive therapy. The increased T-cell yield seemed to be related to inhibition of activation-induced cell death. In this study, using real time-polymerase chain reaction and intracellular staining, we tested our hypothesis that antiapoptotic Bcl gene members are modulated in 4-1BB ligated TDLN cells. TDLN cells activated through 4-1BB in conjunction with CD3/CD28 demonstrated elevated Bcl-2 and Bcl-xL gene and protein expression compared with CD3/CD28 activation. Furthermore, Bcl-2 and/or Bcl-xL inhibition abrogated 4-1BB-conferred rescue of activation-induced cell death in TDLN cells, and as a result, 4-1BB-enhanced TDLN cell yield was abolished. Congenic mice were used as donors for TDLN cells labeled with CFSE to evaluate proliferation and persistence of activated cells after intravenous adoptive transfer. The effector function of transferred cells was assessed by determining the incidence of interferon-gamma-producing cells in response to tumor stimulation in serial blood samples drawn from treated mice using intracellular cytokine staining. CD28 and CD28/4-1BB costimulation significantly enhanced in vivo proliferation and survival of the infused cells compared with CD3 activation. 4-1BB coligation augmented the proliferation and effector function of the infused cells compared with both CD3 and CD3/CD28-activated cells. Characterizing the function of signaling molecules involved in T-cell activation pathways may allow optimization of conditions in the generation of effector T cells for cancer immunotherapy.