心臓および骨格筋のリソソーム：帯状遠心分離による解像度

心臓および骨格筋のホモジネートの分析へのゾーン遠心分離の適用により、リソソーム、筋細胞腫、サルコプラズム網膜、ミトコンドリアのマーカーで濃縮される画分の選択が許可されます。正常および病理学的組織の破壊の方法は、勾配上の酵素活性の総タンパク質とピークの分布を大幅に変化させます。カテプシン、n-アセチル - ベータ - グルコサミニダーゼ、ベータ - グルクロニダーゼ、およびパラニトロフェニルホスファターゼの総活性は、勾配上のショ糖の異なる濃度で分布しています。ベータ - グルクロニダーゼは、リソソームの酸ホスファターゼの一般的なマーカーである骨格筋、パラニトロフェニルホスファターゼの筋細胞質網状体とリソソームを「マーク」するように見えます。阻害されたNa-K-AtPase。したがって、これらの2つの酵素は、少なくとも2つの別々のオルガネラに局在するように見えます。一方、これらの結果は、他のオルガネラの分布ピークに常に関連するリソソームのいくつかの「集団」の分離を示している可能性があります。いずれにせよ、組織の正常および病理学的標本のオルガネラの構造の変化を機能障害、たとえばCa2+の取り込み、Na-K-AtPaseの活性などと相関させる試みには、酵素マーカーまたはクロスの二重局在化の考慮を含める必要があります。他のオルガネラの集団による汚染。

The application of zonal centrifugation to the analysis of homogenates of cardiac and skeletal muscle permits selection of fractions that are enriched in markers for lysosomes, sarcolemma, sarcoplasmic reticulum, and mitochondria. The method of disruption of normal and pathological tissue alters significantly the distribution of total protein and peaks of enzymatic activity on the gradient. Total activities of cathepsin, N-acetyl-beta-glucosaminidase, beta-glucuronidase, and para-nitrophenylphosphatase are distributed at different concentrations of sucrose on the gradient. Beta-Glucuronidase appears to "mark" the sarcoplasmic reticulum, as well as lysosomes, of skeletal muscle, para-Nitrophenylphosphatase, a common marker of acid phosphatase of lysosomes, is enriched in those fractions of cardiac muscle containing the highest specific activity of ouabain-inhibited Na-K-ATPase. Thus, these two enzymes appear to have a localization in at least two separate organelles. On the other hand, these results may indicate the isolation of several "populations" of lysosomes that are associated constantly with distribution peaks of other organelles. In any event, attempts to correlate changes in structure of organelles of normal and pathological specimens of tissue with functional impairment, e.g., Ca2+ uptake, activity of Na-K-ATPase, etc., must include consideration of dual localization of enzymatic markers or cross contamination by populations of other organelles.