RASタンパク質の原形質膜標的化には、CaaxまたはCaalモチーフと2番目のシグナルで十分です

p21RASの変異解析では、原形質膜標的化には、Caaxモチーフと6つのリジン残基のポリ塩基ドメインまたは近くのパルミトイル化部位の組み合わせが必要であることが示されています。ただし、これらの研究から、これらのシグナルだけがP21RAを原形質膜に標的とするかどうかは不明です。ここで、これらのC末端配列は、血漿膜に異種の細胞質タンパク質を標的とするのに十分であることを示しています。興味深いことに、P21K-RAS（b）ポリ血管ドメインの重要な特徴は、ポリアリギンドメインがCaaxボックスとP21K-Ras（B）と組み合わせてモチーフを標的とする血漿膜として機能する可能性があるため、正電荷であるように見えます。アルギニンに置き換えられたドメインは生物学的に活性です。一部のRas関連タンパク質は、ファルネシルではなくゲラニルゲラニルによって修飾されるため、ゲラニルジェラニルによるp21RAの修飾がその細胞内局在に影響するかどうかを調査しました。ゲラニルジェラニルは、P21K-RAS（B）を標的とするポリベースベースドメインと組み合わせる際に、ファルネシルの代替ができますが、そのようなゲラニルガリニル化タンパク質は膜に密接に結合しています。結合のこの増加は、おそらくゲラニルジェラニルアルキル鎖の余分な長さによるものです。

Mutational analysis of p21ras has shown that plasma membrane targeting requires the combination of a CAAX motif with a polybasic domain of six lysine residues or a nearby palmitoylation site. However, it is not known from these studies whether these signals alone target p21ras to the plasma membrane. We now show that these C-terminal sequences are sufficient to target a heterologous cytosolic protein to the plasma membrane. Interestingly, the key feature of the p21K-ras(B) polybasic domain appears to be a positive charge, since a polyarginine domain can function as a plasma membrane targeting motif in conjunction with the CAAX box and p21K-ras(B) with the polylysine domain replaced by arginines is biologically active. Since some ras-related proteins are modified by geranylgeranyl rather than farnesyl we have investigated whether modification of p21ras with geranylgeranyl affects its subcellular localization. Geranylgeranyl can substitute for farnesyl in combining with a polybasic domain to target p21K-ras(B) to the plasma membrane, but such geranylgeranylated proteins are more tightly bound to the membrane. This increased avidity of binding is presumably due to the extra length of the geranylgeranyl alkyl chain.