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Microbiology and immunology20070101Vol.51issue(5)

ポルフィロモナスジンジバリス小説タンパク質SOVの識別ギンギンの分泌に必要な

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

ギンギンは、ポルフィロモナス鉱石の毒性にとって重要な細胞外プロテアーゼです。ただし、歯子岩の分泌のメカニズムはよく理解されていません。このレポートでは、PG0809(83K1および83K2)の挿入変異体が黒い色素と溶血に欠陥があることがわかりました。PG0809をクローン化して配列決定し、PG0809にはW83ゲノムデータベースに堆積されていない2つの追加のヌクレオチドが含まれていることがわかりました。改訂された配列は、PG0810とPG0809のフレーム内融合を明らかにし、SOV遺伝子に指定されています。SOV欠失変異体(83K3)を構築し、83K3が黒い色素沈着、溶血、および血球凝集の活性に欠陥があることを示しました。さらに、83K3では、歯子岩の活性は大幅に減少しましたが、他の分泌プロテアーゼDPPIV、DPP-7、およびPTPAの活性は影響を受けませんでした。抗RGPB抗血清を使用した免疫ブロット分析により、ARG-Gingipainsは外膜または細胞外部分に分泌が不十分であるが、83K3の細胞内に蓄積されていることが示され、83K3で歯子岩の分泌が障害があることが示唆されました。まとめると、我々の発見は、SOVが歯子岩の分泌に必要な新規タンパク質であることを示し、歯子薬の分泌システムは保存された分泌システムとは異なることを示唆しました。

ギンギンは、ポルフィロモナス鉱石の毒性にとって重要な細胞外プロテアーゼです。ただし、歯子岩の分泌のメカニズムはよく理解されていません。このレポートでは、PG0809(83K1および83K2)の挿入変異体が黒い色素と溶血に欠陥があることがわかりました。PG0809をクローン化して配列決定し、PG0809にはW83ゲノムデータベースに堆積されていない2つの追加のヌクレオチドが含まれていることがわかりました。改訂された配列は、PG0810とPG0809のフレーム内融合を明らかにし、SOV遺伝子に指定されています。SOV欠失変異体(83K3)を構築し、83K3が黒い色素沈着、溶血、および血球凝集の活性に欠陥があることを示しました。さらに、83K3では、歯子岩の活性は大幅に減少しましたが、他の分泌プロテアーゼDPPIV、DPP-7、およびPTPAの活性は影響を受けませんでした。抗RGPB抗血清を使用した免疫ブロット分析により、ARG-Gingipainsは外膜または細胞外部分に分泌が不十分であるが、83K3の細胞内に蓄積されていることが示され、83K3で歯子岩の分泌が障害があることが示唆されました。まとめると、我々の発見は、SOVが歯子岩の分泌に必要な新規タンパク質であることを示し、歯子薬の分泌システムは保存された分泌システムとは異なることを示唆しました。

Gingipains are extracellular proteases important for the virulence of Porphyromonas gingivalis; however, the mechanism for the secretion of gingipains is poorly understood. In this report, we found that insertion mutants for PG0809 (83K1 and 83K2) were defective in black pigmentation and hemolysis. We cloned and sequenced PG0809 and found that PG0809 contains two additional nucleotides that are not deposited in the W83 genome database. The revised sequence reveals an in-frame fusion of PG0810 and PG0809 and is designated the sov gene. We constructed a sov deletion mutant (83K3) and showed that 83K3 was defective in the activities of black pigmentation, hemolysis, and hemagglutination. Furthermore, in 83K3, the activities of gingipains were severely reduced whereas those of other secreted proteases DPPIV, DPP-7, and PtpA were not affected. Immunoblot analysis using anti-RgpB antiserum showed that Arg-gingipains were poorly secreted in an outer membrane or into an extracellular portion but accumulated within the cells of 83K3, suggesting the secretion of gingipains is defected in 83K3. Taken together, our findings indicated that Sov is a novel protein required for the secretion of gingipains and suggested that the secretion system for gingipains is different from the conserved secretion systems.

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