7つの馬IgGサブクラスの異なるエフェクター機能機能は、ワクチン戦略に影響を及ぼします

7つの馬IgGサブクラスの組換えバージョンは、CHO細胞で発現しました。すべてがディズルフィドブリッジによって安定化された無傷の免疫グロブリンに組み立てられましたが、ヒトIgG4を連想させる馬のIgG4とIgG7のごく一部は、非共有結合のみによって結合されました。7つのIgGすべてがN-グリコシル化されていました。さらに、IgG3はO-グリコシル化されているように見え、レクチンジャカリンに結合する可能性があります。ブドウ球菌タンパク質Aは、馬のIgGSに対して弱い結合を示しました。連鎖球菌タンパク質Gは、IgG1、IgG4およびIgG7に強く結合し、IgG3に適度に、IgG2およびIgG6に弱く、IgG5にまったくありません。抗体エフェクター機能の分析により、IgG1、IgG3、IgG4、IgG5、IgG7はIgG2およびIgG7ではなく、馬の末梢血白血球から強い呼吸バーストを誘発することができ、前者の5つのIgGサブクラスがFCと相互作用することができると予測することが明らかになりました。エフェクター細胞の受容体。IgG1、IgG3、IgG4およびIgG7は、IgG2、IgG5およびIgG6ではなく、C1Qを補体して、古典経路を介して補体を活性化することができました。サブクラスの微分エフェクター機能能力は、最大の有効性のために、馬ワクチン戦略がIgG1、IgG3、IgG4、およびIgG7サブクラスの抗体応答を誘発しようとするべきであることを示唆しています。

Recombinant versions of the seven equine IgG subclasses were expressed in CHO cells. All assembled into intact immunoglobulins stabilised by disulphide bridges, although, reminiscent of human IgG4, a small proportion of equine IgG4 and IgG7 were held together by non-covalent bonds alone. All seven IgGs were N-glycosylated. In addition IgG3 appeared to be O-glycosylated and could bind the lectin jacalin. Staphylococcal protein A displayed weak binding for the equine IgGs in the order: IgG1>IgG3>IgG4>IgG7>IgG2=IgG5>IgG6. Streptococcal protein G bound strongly to IgG1, IgG4 and IgG7, moderately to IgG3, weakly to IgG2 and IgG6, and not at all to IgG5. Analysis of antibody effector functions revealed that IgG1, IgG3, IgG4, IgG5 and IgG7, but not IgG2 and IgG6, were able to elicit a strong respiratory burst from equine peripheral blood leukocytes, predicting that the former five IgG subclasses are able to interact with Fc receptors on effector cells. IgG1, IgG3, IgG4 and IgG7, but not IgG2, IgG5 and IgG6, were able to bind complement C1q and activate complement via the classical pathway. The differential effector function capabilities of the subclasses suggest that, for maximum efficacy, equine vaccine strategies should seek to elicit antibody responses of the IgG1, IgG3, IgG4, and IgG7 subclasses.