いくつかのアポトーシスマーカーのほぼ違反におけるミトコンドリアアポトーシスの直接トリガーによって誘発されるアポトーシス

アポトーシス細胞死は、一方のアポトーシスシグナル伝達経路の活性化と、核凝縮やミトコンドリア脱分極などの定期的に発見された形態学的および生化学的特徴の活性化によって特徴付けられます。アポトーシスに関する私たちの知識の多くは、細胞培養における有害な刺激を使用して得られましたが、これらのアポトーシス刺激は、アポトーシス経路の即時効果に寄与または曖昧になる可能性のある多くのターゲット効果を持つ可能性があります。ミトコンドリアアポトーシスが、アポトーシス促進性BH3のみのタンパク質BIMのテトラサイクリン調節発現によって直接トリガーされる細胞モデルを開発しました。BIMによるアポトーシスと一般的に使用されるアポトーシス刺激スタウロスポリンとUV光の比較を報告します。ミトコンドリアのシトクロムCおよびSMAC/DIABLOの放出は、カスパーゼの活性化と非常に類似した速度論で発生しましたが、他のアポトーシスアッセイでは顕著な違いが見つかりました。特に、ミトコンドリア膜電位の低下、原形質膜の完全性の喪失、およびサブG1核の出現は、スタウロスポリンまたはUV誘導アポトーシスと比較して、BIM（S）誘導で死にかけている細胞で強く減少しました。したがって、結果は、アポトーシス経路と一般的に使用されたアポトーシスの指標との間のリンクが、細胞毒性刺激の実験から見えるよりも緊密ではないことを示しています。

Apoptotic cell death is characterized by the activation of the apoptotic signal transduction pathway on one hand and a number of regularly found morphological and biochemical features, such as nuclear condensation and mitochondrial depolarisation. Although much of our knowledge of apoptosis was obtained using noxious stimuli in cell culture, these apoptotic stimuli are likely to have numerous off-target effects that may contribute to or obscure the immediate effects of the apoptotic pathway. We have developed a cellular model where mitochondrial apoptosis is directly triggered by the tetracycline-regulated expression of the pro-apoptotic BH3-only protein Bim(S). We report the comparison of Bim(S)-induced apoptosis with the commonly used apoptotic stimuli staurosporine and UV-light. While the release of mitochondrial cytochrome c and Smac/DIABLO, activation of caspases and nuclear morphological changes occurred with very similar kinetics, striking differences were found in other apoptotic assays. In particular, drop in mitochondrial membrane potential, loss of plasma membrane integrity and the appearance of sub-G1 nuclei were strongly reduced in cells dying upon Bim(S)-induction, compared to staurosporine- or UV-induced apoptosis. The results thus indicate that the link between the apoptotic pathway and commonly used indicators of apoptosis is less tight than it appears from experiments with cytotoxic stimuli.