ヘルペスシンプレックスウイルスタイプ1テグメントタンパク質VP22をウイルス粒子に組み込むことは、VP16との相互作用とは無関係です

単純ヘルペスウイルスタイプ1（HSV-1）ビリオンには、ヌクレオカプシドとウイルスのエンベロープの間にあるテグメントと呼ばれるタンパク質酢酸層が含まれています。テグメントの根底にあるメカニズムは、すべてのヘルペスウイルスに対して主に定義されていないままです。グルタチオンS-トランスフェラーゼ（GST）プルダウンと共免疫沈降研究を使用して、VP16との相互作用を促進するTegumentタンパク質VP22のドメインを特定しました。VP22（残基165-225）のこの領域は、VP22（残基165-270）の糖タンパク質E（GE）結合ドメインと重複しており、VP22パッケージを媒介してウイルス粒子の組み立てに十分です。VP16およびVP22のビリオン取り込みへのGE結合活性の寄与を確認するために、2つの結合活性間を識別する点変異体を使用して、トランスフェクション/感染ベースのビリオン取り込みアッセイが利用されました。我々の結果は、VP16との相互作用がウイルス粒子へのVP22の組み込みに必要ではなく、GEの細胞質尾部への結合が包装を促進するのに十分であることを示唆しています。

Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) virions contain a proteinaceous layer termed the tegument that lies between the nucleocapsid and viral envelope. The mechanisms underlying tegumentation remain largely undefined for all herpesviruses. Using glutathione S-transferase (GST) pulldowns and coimmunoprecipitation studies, we have identified a domain of the tegument protein VP22 that facilitates interaction with VP16. This region of VP22 (residues 165-225) overlaps the glycoprotein E (gE) binding domain of VP22 (residues 165-270), which is sufficient to mediate VP22 packaging into assembling virus particles. To ascertain the contribution of the VP16 and gE binding activities of VP22 to its virion incorporation, a transfection/infection based virion incorporation assay, using point mutants that discern between the two binding activities, was utilized. Our results suggest that interaction with VP16 is not required for incorporation of VP22 into virus particles and that binding to the cytoplasmic tail of gE is sufficient to facilitate packaging.