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BioTechniques1991Oct01Vol.11issue(4)

ムタノリシンを使用したリステリアおよび他のグラム陽性細菌の溶解の迅速かつ効率的な方法

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PMID:1793575DOI:
文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

グラム陽性菌からの核酸および無傷のリボソームRNAの調製のための細胞溶解については、迅速かつ単純な手順が記載されています。市販のムタノリシン(Streptomyces globisporusから精製)を使用して溶解を誘導しました。リステリア、ラクトバチルス、および乳酸球菌株は、リゾチームと比較した場合、ムタノリシンに非常に敏感でした。ムタノリシンに対する感受性は、アセトンによる予備処理により改善され、硫酸ナトリウムはムタノリシンと一緒に使用すると溶解の効率を低下させました。この手順は、これらの細菌からプラスミドを回収するのにも効果的でした。

グラム陽性菌からの核酸および無傷のリボソームRNAの調製のための細胞溶解については、迅速かつ単純な手順が記載されています。市販のムタノリシン(Streptomyces globisporusから精製)を使用して溶解を誘導しました。リステリア、ラクトバチルス、および乳酸球菌株は、リゾチームと比較した場合、ムタノリシンに非常に敏感でした。ムタノリシンに対する感受性は、アセトンによる予備処理により改善され、硫酸ナトリウムはムタノリシンと一緒に使用すると溶解の効率を低下させました。この手順は、これらの細菌からプラスミドを回収するのにも効果的でした。

A rapid and simple procedure is described for cell lysis for preparation of nucleic acids and intact ribosomal RNA from Gram-positive bacteria. Commercial mutanolysin (purified from Streptomyces globisporus) was used for inducing lysis. Listeria, Lactobacillus and Lactococcus strains were very sensitive to mutanolysin when compared to lysozyme. Susceptibility to mutanolysin was improved by a preliminary treatment with acetone, and sodium dodecyl sulfate reduced the efficiency of lysis when used together with mutanolysin. The procedure was also effective for recovering plasmids from these bacteria.

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