TCR遺伝子移動によるWilMS腫瘍抗原1の標的1：TCRバリアントはテトラマーの結合を改善しますが、遺伝子修飾ヒトT細胞の機能は改善しません

以前に、WILMS腫瘍AG 1（WT1）に由来するHLA-A2存在ペプチドに特異的なヒトTCRの機能活性について説明しました。最近の研究では、ヒトTCRの発現と機能が、アルファ鎖とベータ鎖とベータ鎖の間に追加のジスルフィド結合の導入またはマウス配列のヒト定数領域の交換により改善されたことが示されました。この研究では、Jurkat細胞および一次T細胞で発現するWT1-TCRバリアントの機能活性を分析しました。システイン残基またはマウス定数配列がWT1-TCRに導入されても、野生型TCR鎖による誤った誤りの世界的な減少は得られませんでした。代わりに、誤検査のレベルは、野生型TCR鎖の可変領域配列の影響を受けました。新たに導入された末梢血T細胞の分析により、修飾されたTCR構築物の移動により、野生型TCRの移動よりも高い周波数のAg応答性T細胞が生成されることが示されました。数回のペプチド刺激の後、すべての形質導入されたT細胞集団がAg応答性T細胞の約90％を蓄積したため、この違いはもはや観察されませんでした。修飾されたTCRを発現するAg応答性T細胞は、野生型TCRを発現するT細胞よりもHLA-A2/WT1テトラマーをより効率的に結合しましたが、これにより、導入されたT細胞の悪化が改善されず、測定可能な増強をもたらしませんでした。IFN-GAMMAの生産と細胞毒性活性。これは、修飾されたWT1-TCRバリアントの強化されたテトラマー結合が、WT1特異的T細胞機能の改善と関連していないことを示しています。

We have previously described the functional activity of a human TCR specific for an HLA-A2-presented peptide derived from the Wilms tumor Ag 1 (WT1). Recent studies showed that the expression and function of human TCR was improved by the introduction of an additional disulfide bond between the alpha- and beta-chains or by the exchange of the human constant region for murine sequences. In this study, we analyzed the functional activity of WT1-TCR variants expressed in Jurkat cells and in primary T cells. The introduction of cysteine residues or murine constant sequences into the WT1-TCR did not result in a global reduction of mispairing with wild-type TCR chains. Instead, the level of mispairing was affected by the variable region sequences of the wild-type TCR chains. The analysis of freshly transduced peripheral blood T cells showed that the transfer of modified TCR constructs generated a higher frequency of Ag-responsive T cells than the transfer of the wild-type TCR. After several rounds of peptide stimulation this difference was no longer observed, as all transduced T cell populations accumulated approximately 90% of Ag-responsive T cells. Although the Ag-responsive T cells expressing the modified TCR bound the HLA-A2/WT1 tetramer more efficiently than T cells expressing the wild-type TCR, this did not improve the avidity of transduced T cells nor did it result in a measurable enhancement in IFN-gamma production and cytotoxic activity. This indicated that the enhanced tetramer binding of modified WT1-TCR variants was not associated with improved WT1-specific T cell function.