カゼイン修正による低温での土壌におけるプロテアーゼ活性の推定および脱灰水による緩衝液の置換による推定

この作業の目的は、カゼインの測定の適合性を評価するために、TRIS-HCLバッファー（pH 8.52）を脱灰水（Demi H（2）O）に置き換えることにより、Ladd and Buttler（1972）の方法を変更することでした。-H（2）oの実際の土壌のそれに近いpHレベルでの活動を促進します。測定は、3〜49度の潜在温度の範囲で行われました。1つの有機土壌と2つの異なる鉱物土壌で試験が行われました。49度CでのDemi H（2）OによるTRIS-HCl緩衝液の置換により、カゼインプロテアーゼ活性は鉱物土壌で67.25％、有機土壌で53.76％に減少しました。温度が低下すると、カゼインプロテアーゼ活性は有機土壌で最も減少しました。つまり、元の値の0.07％が3度Cで、インキュベーション期間は3度Cで最大336時間まで拡張して、L-チロシンの10.0％を> 10.0％> 10.0％獲得しました。最適または最適温度およびpH条件に近い等価物。TRIS-HCLバッファーをDeMi H（2）Oに置き換えた後に測定されたカゼインプロテアーゼ活性のQ（10）値は、予期せず高かった。3〜49度C Q（10）の温度は3.46から4.25の範囲でしたが、3〜25度C Q（10）は6.78から11.08の範囲でした。したがって、提示されたLadd and Buttler（1972）の修正された方法は、実際の土壌pHのそれに近いpH条件下で、および野外で測定された平均土壌温度で土壌カゼインプロテアーゼ活性の測定に使用できます。この変更により、カゼインの高濃度が存在する場合、最適または最適な温度とpH条件に近いカゼインプロテアーゼ活性の測定と組み合わせると、土壌カゼインプロテアーゼ活性の可能性の発現が可能になります。

The aim of this work was to modify the method of Ladd and Buttler (1972), by substituting Tris-HCl buffer (pH 8.52) with demineralized water (DEMI H(2)O), in order to assess its suitability for measurement of casein-protease activity at pH levels close to those of real soil in H(2)O. Measurements were undertaken over a range of incubation temperatures from 3 to 49 degrees C. Testing was performed on one organic soil and two different mineral soils. The substitution of Tris-HCl buffer by DEMI H(2)O at 49 degrees C decreased casein-protease activity to 67.25% in mineral soil and to 53.76% in organic soil. With decreasing temperature casein-protease activity decreased the most in organic soil, i.e., 0.07% of original its value at 3 degrees C. The incubation period was extended to maximally 336 h at 3 degrees C to totally obtain >10.0% of L-tyrosine equivalents released at optimum or close to optimum temperature and pH conditions. The Q(10) values of casein-protease activity measured after substituting Tris-HCl buffer with DEMI H(2)O were unexpectedly high. Between the temperatures of 3 and 49 degrees C Q(10) ranged from 3.46 to 4.25, whereas between 3 and 25 degrees C Q(10) ranged from 6.78 to 11.08. Therefore, the modified method of Ladd and Buttler (1972) presented can be used for measurement of soil casein-protease activity under pH conditions close to that of real soil pH and at an averaged soil temperatures measured in the field. This modification makes possible an expression of soil casein-protease activity potential - when being combined with measurements of casein-protease activity under optimum or close to optimum temperature and pH conditions, if high concentration of casein is present.