Geobacter SulfurreducensのOMCBとOMPBが外膜表面タンパク質であるという証拠

Geobacter SulfurreducensによるFe（III）酸化物の還元に必要なC型シトクロム（OMCB）およびマルチコップタンパク質（OMPB）は、以前に外膜タンパク質であると予測されていましたが、それらが可能な方法で配置されているかどうかは明らかではありません。Fe（III）との相互作用。プロテイナーゼKで細胞全体を処理すると、Fe（III）の減少が阻害されましたが、内膜関連のフマル酸還元に影響はありませんでした。OMCBはプロテアーゼによって消化され、より小さなペプチドをもたらしました。ただし、透過型電子顕微鏡と相まって免疫金標識はOMCBを検出せず、細胞表面に部分的にしか露出していないことを示唆しています。対照的に、OMPBはプロテアーゼで完全に消化されました。OMPBは、培養上清でそのかなりの部分が回収されたため、細胞表面と大まかに関連していました。免疫金標識は、細胞に関連するOMPBが、導電性ピリのように細胞の片側に局在するのではなく、細胞表面に均等に分布していることを実証しました。Fe（III）酸化物の減少に必要ないくつかのタンパク質は、G。sulfurreducensの外面に露出することが示されていますが、OMCBが表面露出しているという発見は、最適なFe（III）の還元に必要なタンパク質の最初の報告です。細胞表面で最も部分的にアクセスできます。

The c-type cytochrome (OmcB) and the multicopper protein (OmpB) required for Fe(III) oxide reduction by Geobacter sulfurreducens were predicted previously to be outer membrane proteins, but it is not clear whether they are positioned in a manner that permits the interaction with Fe(III). Treatment of whole cells with proteinase K inhibited Fe(III) reduction, but had no impact on the inner membrane-associated fumarate reduction. OmcB was digested by protease, resulting in a smaller peptide. However, immunogold labeling coupled with transmission electron microscopy did not detect OmcB, suggesting that it is only partially exposed on the cell surface. In contrast, OmpB was completely digested with protease. OmpB was loosely associated with the cell surface as a substantial portion of it was recovered in the culture supernatant. Immunogold labeling demonstrated that OmpB associated with the cell was evenly distributed on the cell surface rather than localized to one side of the cell like the conductive pili. Although several proteins required for Fe(III) oxide reduction are shown to be exposed on the outer surface of G. sulfurreducens, the finding that OmcB is also surface exposed is the first report of a protein required for optimal Fe(III) citrate reduction at least partially accessible on the cell surface.