血清および血漿中のタンパク質を定量化するために、層ごとにコーティングされたデジタルエンコードされたマイクロキャリア

「レイヤーバイレイヤー」（LBL）テクノロジーは、高分子電解質を含む平らな基質とカプセルのコーティングについて広く調査されています。この研究では、血清、血漿、血液などの複雑な生体サンプルにおけるタンパク質の定量的、敏感、同時に同時に、デジタルエンコードされたマイクロキャリアの表面に適用されたLBL高分子電解質コーティングを評価しました。したがって、LBLコーティングされたマイクロキャリアは、抗体を捕捉するために結合されました。抗体は、腫瘍壊死因子（TNF-alpha）、p24、および卵胞刺激ホルモン（FSH）の検出のための捕獲剤として使用されました。LBLコーティングは、血清および血漿中のマイクロキャリアをインキュベートする際に分解しないことがわかった。また、LBLコーティングへの標的分析物の非特異的結合は観察されませんでした。LBLコーティングされたマイクロキャリアは、緩衝液だけでなく血清および血漿サンプルでも、ミリリットルあたりのピコグルまでTNF-alpha、p24、およびFSHを再現性に検出できることを示しました。マイクロキャリアからマクラリアのイントラチューブの変動は30％未満であり、アッセイ間変動は8％未満で観察されました。このホワイトペーパーは、LBLコーティングされたデジタルエンコードされたマイクロキャリアが、「ポイントオブケア」診断に大きな関心を持つマイクロ流体チップの「全」血液中のタンパク質をアッセイするのに理想的に適しているという証拠を示しています。

The "layer-by-layer" (LbL) technology has been widely investigated for the coating of flat substrates and capsules with polyelectrolytes. In this study, LbL polyelectrolyte coatings applied at the surface of digitally encoded microcarriers were evaluated for the quantitative, sensitive, and simultaneous detection of proteins in complex biological samples like serum, plasma, and blood. LbL coated microcarriers were therefore coupled to capture antibodies, which were used as capture agents for the detection of tumor necrosis factor (TNF-alpha), P24, and follicle stimulating hormone (FSH). It was found that the LbL coatings did not disassemble upon incubating the microcarriers in serum and plasma. Also, nonspecific binding of target analytes to the LbL coating was not observed. We showed that the LbL coated microcarriers can reproducibly detect TNF-alpha, P24, and FSH down to the picogram per milliliter level, not only in buffer but also in serum and plasma samples. Microcarrier-to-microcarrier intratube variations were less then 30%, and interassay variations less than 8% were observed. This paper also shows evidence that the LbL coated digitally encoded microcarriers are ideally suited for assaying proteins in "whole" blood in microfluidic chips, which are of high interest for "point-of-care" diagnostics.