線形勾配溶出を伴う逆相HPLCの保持モデルによるプリン化合物の溶出帯域幅の予測

逆相液体クロマトグラフィーでは、溶質の保持メカニズムは、線形プログラムされた勾配モバイル相条件下で研究されています。4つのプリン化合物（プリン、テオブロミン、テオフィリン、カフェイン）の混合物の分離は、2つのバイナリ移動相システム、水/メタノールと水/アセトニトリルの実用的な症例と見なされました。保持因子がモバイル相組成にどのように関連しているかを説明する保持モデルは、線形溶出と勾配溶出の両方で保持時間を予測するためにさまざまな数学的形式で開発されています。サンプルのパルス注入の場合、2つの重要な要因、保持時間と溶質の帯域幅は、ガウス分布関数などの分布関数によって推定される溶出プロファイルを予測するために計算可能である可能性があります。この作業では、リニア勾配溶出の帯域幅を計算するために、保持モデルの類似体に基づく予測方法が提案されました。バンドの広がりは、クロマトグラフィー柱の溶質帯域の前端と後端の異なる移動速度によって引き起こされました。したがって、溶質帯域の前端と後端の移動行動は、溶質の保持時間を予測するために使用されていた同じ保持モデルで説明されました。十分に保持された溶質、テオフィリン、カフェインの場合、予測された帯域幅と実験的に得られた帯域幅は、Isocraticと勾配の両方の排出量で良好な一致を示しました。

In reversed-phase liquid chromatography, the retention mechanism of solute has been studied under linearly programmed gradient mobile-phase conditions. The separation of a mixture of four purine compounds (purine, theobromine, theophylline, and caffeine) was considered as a practical case in two binary mobile phase systems, water/methanol and water/acetonitrile. The retention model which describes how the retention factor is related to the mobile-phase composition has been developed in various mathematical forms to predict the retention time in both linear and gradient elutions. For a pulse injection of sample, two important factors, the retention time and the bandwidth of solute, might be computable to predict the elution profiles estimated by the distribution function, such as the Gaussian distribution function. In this work, a prediction method based on the analogue of the retention model was proposed to calculate the bandwidth in linear gradient elutions. Band broadening was caused by the different migration velocities of the front and rear ends of the solute band in a chromatographic column. Therefore, the migration behaviors of the front and rear ends of the solute band were explained with the same retention model which had been used to predict the retention time of solute. For the well retained solutes, theophylline and caffeine, the predicted bandwidth and experimentally obtained bandwidth showed good agreement in both isocratic and gradient elutions.