in vitroおよびin vivoでのノッチシグナル伝達の阻害による腎細胞癌の成長の抑制

腫瘍抑制因子遺伝子von Hippel-Lindau（VHL）の喪失は、透明細胞腎細胞癌（CCRCC）の腫瘍形成において重要な役割を果たします。この損失は、HIF転写複合体の安定化につながり、腫瘍形成に不可欠な血管新生およびマイトジェン性経路を誘導します。それにもかかわらず、CCRCC腫瘍の形成には追加の発癌性イベントが必要であると仮定されています。ここでは、Notch Signaling CascadeがVHL/HIF経路とは無関係にヒトCCRCC細胞株で構成的に活性があることを示します。ノッチシグナル伝達をブロックすると、CCRCC細胞株の増殖と抑制されたアンカレッジに依存しない成長が減衰しました。さまざまなノッチ受容体を標的とするsiRNAを使用して、ノッチシグナル伝達経路の成長促進効果がNOTCH-1に起因し、NOTCH-1ノックダウンが陰性細胞周期調節因子P21 CIP1および/またはP27 KIP1のレベルの上昇を伴うことを確立しました。。Notchシグナル伝達の阻害剤によるヌードマウスの治療は、異種移植CCRCC細胞の成長を強力に阻害しました。さらに、Notch-1およびNotch Ligand Jagged-1は、正常なヒト腎組織よりもCCRCC腫瘍で有意に高いレベルで発現し、一次CCRCC細胞の成長はノッチシグナル伝達の阻害により減衰しました。これらの発見は、ノッチカスケードがCCRCCの新規で治療的にアクセス可能な経路を表している可能性があることを示しています。

Loss of the tumor suppressor gene von Hippel-Lindau (VHL) plays a key role in the oncogenesis of clear cell renal cell carcinoma (CCRCC). The loss leads to stabilization of the HIF transcription complex, which induces angiogenic and mitogenic pathways essential for tumor formation. Nonetheless, additional oncogenic events have been postulated to be required for the formation of CCRCC tumors. Here, we show that the Notch signaling cascade is constitutively active in human CCRCC cell lines independently of the VHL/HIF pathway. Blocking Notch signaling resulted in attenuation of proliferation and restrained anchorage-independent growth of CCRCC cell lines. Using siRNA targeting the different Notch receptors established that the growth-promoting effects of the Notch signaling pathway were attributable to Notch-1 and that Notch-1 knockdown was accompanied by elevated levels of the negative cell-cycle regulators p21 Cip1 and/or p27 Kip1. Treatment of nude mice with an inhibitor of Notch signaling potently inhibited growth of xenotransplanted CCRCC cells. Moreover, Notch-1 and the Notch ligand Jagged-1 were expressed at significantly higher levels in CCRCC tumors than in normal human renal tissue, and the growth of primary CCRCC cells was attenuated upon inhibition of Notch signaling. These findings indicate that the Notch cascade may represent a novel and therapeutically accessible pathway in CCRCC.