マウス黒色腫モデルにおける確立された腫瘍のT細胞受容体遺伝子治療

転移性黒色腫患者に腫瘍浸潤リンパ球を使用した養子細胞導入療法は、有意な客観的反応率を示しています。これらの現在の治療法の主要な制限の1つは、治療のために腫瘍反応性リンパ球を分離することが頻繁にないことです。腫瘍抗原特異的T細胞受容体（TCRS）をコードするレトロウイルスベクターによる末梢血リンパ球の遺伝子工学は、この制限をバイパスします。TCR遺伝子治療の有効性を評価するために、マウス治療モデルが開発されました。B16黒色腫抗原GP100を標的とするPMEL-1 TCR遺伝子をコードするレトロウイルスベクターが構築されました。C57BL/6リンパ球の形質導入により、効率的なPMEL-1 TCR発現が生じました。このレトロウイルスで形質導入されたリンパ球は、インターフェロンガンマ分泌アッセイで測定されるように、GP100パルス標的細胞を特異的に認識しました。B16腫瘍を含むマウスに移動すると、遺伝子組み換えリンパ球が腫瘍の発生を著しく遅くしました。腫瘍治療の有効性は、投与されたTCR設計T細胞の数と直接相関していました。これらの結果は、天然の腫瘍抗原を標的とするTCR遺伝子治療が、確立された腫瘍の成長を大幅に遅らせることを実証しました。C57BL/6リンパ球が抗原反応性PMEL-1 T細胞に添加された場合、PMEL-1 T細胞がB16メラノーマを治療する能力の低下が見られ、トランスデュード細胞がTCR遺伝子療法に対して不安定である可能性があることを示唆しています。このモデルは、将来のTCR遺伝子転移ベースの戦略を評価するための強力なツールかもしれません。

Adoptive cell transfer therapy using tumor-infiltrating lymphocytes for patients with metastatic melanoma has demonstrated significant objective response rates. One major limitation of these current therapies is the frequent inability to isolate tumor-reactive lymphocytes for treatment. Genetic engineering of peripheral blood lymphocytes with retroviral vectors encoding tumor antigen-specific T-cell receptors (TCRs) bypasses this restriction. To evaluate the efficacy of TCR gene therapy, a murine treatment model was developed. A retroviral vector was constructed encoding the pmel-1 TCR genes targeting the B16 melanoma antigen, gp100. Transduction of C57BL/6 lymphocytes resulted in efficient pmel-1 TCR expression. Lymphocytes transduced with this retrovirus specifically recognized gp100-pulsed target cells as measured by interferon-gamma secretion assays. Upon transfer into B16 tumor-bearing mice, the genetically engineered lymphocytes significantly slowed tumor development. The effectiveness of tumor treatment was directly correlated with the number of TCR-engineered T cells administered. These results demonstrated that TCR gene therapy targeting a native tumor antigen significantly delayed the growth of established tumors. When C57BL/6 lymphocytes were added to antigen-reactive pmel-1 T cells, a reduction in the ability of pmel-1 T cell to treat B16 melanomas was seen, suggesting that untransduced cells may be deleterious to TCR gene therapy. This model may be a powerful tool for evaluating future TCR gene transfer-based strategies.