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Leishmania(Leishmania)Chagasiから30 kDaのシステインプロテイナーゼをコードする遺伝子LDCCYS1、およびフィスベクターのLDCCYS1遺伝子のクローン化と発現によって得られた組換えシステインプロテイナーゼRLDCCYS1をコードすることは、免疫保護剤を評価するために使用されるために使用されました。L.(L.)Chagasi感染に対するBALB/Cマウスの反応。マウスをrldccys1とバチルカルメットゲリン(BCG)またはプロピオニバクテリウムアジュバントとして皮下に免疫した、または筋肉内にLDCCYS1遺伝子(LDCCYS1/pCDNA3)を運ぶプラスミドと筋肉内で筋肉内に症状を免疫し、補助剤としてCPG ODNを搭載し、CPGS1を使用して補助剤として続いた。予防接種の2週間後、動物はL.(L。)Chagasiの1 x 10(7)amastigotesで挑戦されました。両方の免疫プロトコルは、非免疫化されたコントロールと比較して免疫化されたマウスの脾臓の非常に低い寄生虫負荷によって示されるように、L。(L.)チャガシ感染に対する有意な保護を誘発しました。しかし、DNA予防接種は、組換えタンパク質による免疫よりも10倍保護的でした。RLDCCYS1はIFN-GAMMAおよび一酸化窒素(NO)の有意な分泌を誘発しましたが、LDCCYS1遺伝子を免疫した動物は、IgG2A抗体、IFN-GAMMAおよびNOの産生を増加させました。これらの結果は、2つの予防接種プロトコルによって引き起こされる保護が主要なTH1応答と相関していることを示しています。
Leishmania(Leishmania)Chagasiから30 kDaのシステインプロテイナーゼをコードする遺伝子LDCCYS1、およびフィスベクターのLDCCYS1遺伝子のクローン化と発現によって得られた組換えシステインプロテイナーゼRLDCCYS1をコードすることは、免疫保護剤を評価するために使用されるために使用されました。L.(L.)Chagasi感染に対するBALB/Cマウスの反応。マウスをrldccys1とバチルカルメットゲリン(BCG)またはプロピオニバクテリウムアジュバントとして皮下に免疫した、または筋肉内にLDCCYS1遺伝子(LDCCYS1/pCDNA3)を運ぶプラスミドと筋肉内で筋肉内に症状を免疫し、補助剤としてCPG ODNを搭載し、CPGS1を使用して補助剤として続いた。予防接種の2週間後、動物はL.(L。)Chagasiの1 x 10(7)amastigotesで挑戦されました。両方の免疫プロトコルは、非免疫化されたコントロールと比較して免疫化されたマウスの脾臓の非常に低い寄生虫負荷によって示されるように、L。(L.)チャガシ感染に対する有意な保護を誘発しました。しかし、DNA予防接種は、組換えタンパク質による免疫よりも10倍保護的でした。RLDCCYS1はIFN-GAMMAおよび一酸化窒素(NO)の有意な分泌を誘発しましたが、LDCCYS1遺伝子を免疫した動物は、IgG2A抗体、IFN-GAMMAおよびNOの産生を増加させました。これらの結果は、2つの予防接種プロトコルによって引き起こされる保護が主要なTH1応答と相関していることを示しています。
The gene Ldccys1 encoding a cysteine proteinase of 30 kDa from Leishmania (Leishmania) chagasi, as well as the recombinant cysteine proteinase rLdccys1, obtained by cloning and expression of the Ldccys1 gene in the pHIS vector, were used to evaluate their ability to induce immune protective responses in BALB/c mice against L. (L.) chagasi infection. Mice were immunized subcutaneously with rLdccys1 plus Bacille Calmette Guerin (BCG) or Propionibacterium acnes as adjuvants or intramuscularly with a plasmid carrying the Ldccys1 gene (Ldccys1/pcDNA3) and CpG ODN as the adjuvant, followed by a booster with rLdccys1 plus CpG ODN. Two weeks after immunization the animals were challenged with 1 x 10(7) amastigotes of L. (L.) chagasi. Both immunization protocols induced significant protection against L. (L.) chagasi infection as shown by a very low parasite load in the spleen of immunized mice compared to the non-immunized controls. However, DNA immunization was 10-fold more protective than immunization with the recombinant protein. Whereas rLdccys1 induced a significant secretion of IFN-gamma and nitric oxide (NO), animals immunized with the Ldccys1 gene increased the production of IgG2a antibodies, IFN-gamma and NO. These results indicated that protection triggered by the two immunization protocols was correlated to a predominant Th1 response.
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