成熟した内皮付着接合部のアーキテクチャへのアネキシン2の貢献

血管内皮カドヘリン（VE-CAD）ベースの複合体は、血管内皮の完全性の維持に関与しています。免疫沈降実験を使用して、コンフルエントなヒト臍静脈内皮細胞では、VE-CADベースの複合体がアネキシン2と相互作用し、細胞濃度が確立されるように細胞質から細胞細胞接触部位にアネキシン2が移行することを実証しました。コレステロールラフトに位置するアネキシン2は、アクチン細胞骨格とVE-CADベースの複合体の両方に結合するため、複合体はコレステロールラフトにドッキングされます。これらの複数の接続は、VE-CADベースの複合体の横方向の拡散を防ぐため、成熟の究極のステップで接着接合部を強化します。さらに、小さな干渉RNAによるアネキシン2のダウンレギュレーションは、接着接合部からのVE-CADの非局在化を誘導し、その結果、これらの接合部の不安定化を誘導することが観察されました。さらに、我々のデータは、血管内皮成長因子処理によって引き起こされるVE-CADベースの接合部からのアネキシン2/P11複合体の分離が、静止状態から未熟な状態への切り替えを促進することを示しています。

The vascular endothelial cadherin (VE-cad)-based complex is involved in the maintenance of vascular endothelium integrity. Using immunoprecipitation experiments, we have demonstrated that, in confluent human umbilical vein endothelial cells, the VE-cad-based complex interacts with annexin 2 and that annexin 2 translocates from the cytoplasm to the cell-cell contact sites as cell confluence is established. Annexin 2, located in cholesterol rafts, binds to both the actin cytoskeleton and the VE-cad-based complex so the complex is docked to cholesterol rafts. These multiple connections prevent the lateral diffusion of the VE-cad-based complex, thus strengthening adherens junctions in the ultimate steps of maturation. Moreover, we observed that the down-regulation of annexin 2 by small interfering RNA induces a delocalization of VE-cad from adherens junctions and consequently a destabilization of these junctions. Furthermore, our data indicate that the decoupling of the annexin 2/p11 complex from the VE-cad-based junction, triggered by vascular endothelial growth factor treatment, facilitates the switch from a quiescent to an immature state.