アスパラギニルペプチドの環状イミドを介した脱アミド化：塩、緩衝液、有機溶媒への依存

ASN側鎖の脱アミド化反応は、ペプチドとタンパク質の精製と結晶化に通常高濃度で使用される化学物質の存在下で研究されました。すべての実験は、モデルペプチドBOC-L-ASN-GLY-GLY-NH2で実施されました。反応の経路は、使用される培地の影響を受けません。すべての場合において、それはコキシニミド中間体を介して進行し、イソスパルチルとアスパルティルペプチドの混合物を与えます。ただし、反応の速度は溶媒に大きく依存します。ペプチドの水溶液への有機溶媒を添加すると、反応速度が低下する一般的な効果があり、一方、高濃度の高濃度によって強く増加します。有機および無機緩衝液。非難塩とポリエチレングリコールによってわずかな影響のみが発揮されます。

The deamidation reaction of Asn side chain was studied in the presence of the chemicals usually used at high concentration in the purification and crystallization of peptides and proteins. All the experiments were performed on the model peptide Boc-L-Asn-Gly-Gly-NH2. The pathway of the reaction is not affected by the medium used; in all cases it proceeds through a succinimide intermediate giving a mixture of isoaspartyl and aspartyl peptide. However, the rate of the reaction significantly depends on the solvent: the addition of organic solvents to an aqueous solution of the peptide has the general effect of decreasing the reaction rate, which, on the other hand, is strongly enhanced by a high concentration of organic and inorganic buffers. Only a minor influence is exerted by aprotic salts and polyethylene glycol.