p34CDC2とサイクリンBを含む複合体は、核ラミンをリン酸化し、in vitroでアサリ卵母細胞の核を分解します

活性化したクラム卵母細胞から調製された細胞のない抽出物には、単一の67-kdラミン（L67）のリン酸化を誘導し、ハム卵子卵母細胞核を分解し、in vitroで染色体凝縮を引き起こす因子が含まれています（Dessev、G.、R。Palazzo、L。Rebhun、およびR.ゴールドマン。これらの要因を特定するために、卵母細胞抽出物を分割しました。核層分解（NLD）活性は、L67に特異的なプロテインキナーゼ活性とともに、多くの精製ステップを通じて単一のピークとして現れます。このピークには、M相促進因子（MPF）の成分であるP34CDC2、サイクリンB、およびヒストンH1-キナーゼ活性も含まれています。NLD/L67-キナーゼ活性は、この精製材料をp13SUC1に結合したセファロースに曝露することにより枯渇し、HeLa細胞からp34CDC2/P62複合体の添加時に回復します。後者の複合体は、L67をリン酸化し、他のクラム卵母細胞タンパク質がない場合にNLDを誘導します。我々の結果は、単一のタンパク質キナーゼ活性（MPFと同一のp34CDC2-H1キナーゼ）がラミンをリン酸化し、アサリ卵母細胞の核エンベロープの減数分裂に関与していることを示唆しています。

Cell-free extracts prepared from activated clam oocytes contain factors which induce phosphorylation of the single 67-kD lamin (L67), disassemble clam oocyte nuclei, and cause chromosome condensation in vitro (Dessev, G., R. Palazzo, L. Rebhun, and R. Goldman. 1989. Dev. Biol. 131:469-504). To identify these factors, we have fractionated the oocyte extracts. The nuclear lamina disassembly (NLD) activity, together with a protein kinase activity specific for L67, appear as a single peak throughout a number of purification steps. This peak also contains p34cdc2, cyclin B, and histone H1-kinase activity, which are components of the M-phase promoting factor (MPF). The NLD/L67-kinase activity is depleted by exposure of this purified material to Sepharose conjugated to p13suc1, and is restored upon addition of a p34cdc2/p62 complex from HeLa cells. The latter complex phosphorylates L67 and induces NLD in the absence of other clam oocyte proteins. Our results suggest that a single protein kinase activity (p34cdc2-H1 kinase, identical with MPF) phosphorylates the lamin and is involved in the meiotic breakdown of the nuclear envelope in clam oocytes.