小さな核小体RNPタンパク質NOP1（フィブリラリン）は、酵母でのプレ-RNA処理に必要です

酵母の雪タンパク質であるNOP1は、脊椎動物のフィブリラリンと構造的および機能的に相同性であり、生存率に不可欠です。GALプロモーターの制御下にNOP1発現を配置することにより、条件付き致命的な対立遺伝子が構築されました。グルコース培地の成長は、数世代にわたってNOP1の枯渇をもたらし、その間に細胞の成長が徐々に損なわれます。タンパク質のパルス標識は、NOP1枯渇した株が細胞質リボソームの産生に大きく損なわれ、rRNAのレベルが低下していることを示しています。Pre-RRNAの北部のハイブリダイゼーションとパルスチェース標識は、すべてのrRNA処理手順の進行性障害を示しています。18S rRNAにつながる経路は特に影響を受けます。pre-rRNAのメチル化は、付随的に損なわれ、メチル化されていないプレ-RNAが蓄積され、長期間にわたって処理されません。NOP1の枯渇は、U3を含むテストされた7つの竜の蓄積を妨げません。U14とSNR190の2つの種のレベルが低下します。NOP1がTMGキャップ構造を保持していない場合に合成されたスノルナ。核下分別と免疫細胞化学は、それらが核小体に局在し続けることを示しています。

The yeast snoRNP protein, NOP1, is structurally and functionally homologous to vertebrate fibrillarin and is essential for viability. A conditionally lethal allele was constructed by placing NOP1 expression under the control of a GAL promoter. Growth on glucose medium results in the depletion of NOP1 over several generations, during which cell growth is progressively impaired. Pulse labelling of proteins shows that NOP1 depleted strains are greatly impaired in the production of cytoplasmic ribosomes, and they have a reduced level of rRNA. Northern hybridization and pulse-chase labelling of pre-rRNA show a progressive impairment of all pre-rRNA processing steps. The pathway leading to 18S rRNA is particularly affected. Methylation of pre-rRNA is concomitantly impaired and unmethylated pre-rRNA accumulates and is not processed over long periods. NOP1 depletion does not prevent the accumulation of seven snoRNAs tested including U3; the levels of two species, U14 and snR190, decline. The snoRNAs synthesized in the absence of NOP1 retain TMG cap structures. Subnuclear fractionation and immunocytochemistry indicate that they continue to be localized in the nucleolus.