活性化時のヒトガンマT細胞受容体を含む細胞の表現型の変化と増殖活性

最初に、KI67と抗抗抗体で染色された二重色の免疫蛍光炎症を使用して、植物ヘマグルチニン（PHA）刺激後、アルファベータT細胞受容体（TCR）（ベータF1+）およびガンマデルタTCR（TCR Delta-1+）ヒトT細胞の増殖活性を比較しました。-brduモノクローナル抗体（MOABS）。分裂活性はアルファベータTCR細胞内で高かった：3日間の培養後69.9 +/- 5.9％ベータF1 +細胞の5.9％はKi67を発現し、これらの細胞の44.8 +/- 4.8％はBRDUの取り込みによって明らかにされたDNAを合成した。対照的に、同じサンプルのTCR Delta-1+細胞の18.9 +/- 1.6％と12.0 +/- 1.2％のみがKi67+とBrdu+でした。V Delta 1-j Delta 1の使用（Delta TCS-1 +）の細胞は、他のガンマDelta TCR細胞よりも高いサイクリング活性を示しました：3日間のPHA刺激の後、51.1 +/- 18.3％および18.3 +/- 6.1そのような細胞の％は、それぞれサイクルでDNAを合成しました。次に、末梢血アルファベータTCRおよびガンマデルタTCRリンパ球上のCD45アイソフォームの発現を研究しました。アルファベータTCRセル内では、SN130（CD45RA）MOAB：64.1 +/- 10.2％で標識した後、2つの異なる亜集団が明るく、35.9 +/- 10.2％は薄暗いまたは陰性でした。同様に、ほとんどのTCR Delta-1 +細胞はSN130（CD45RA）を発現しました：87.5 +/- 3.0％は明るく、12.5 +/- 3.0％はDIMでした。ただし、アルファベータTCR+細胞とは対照的に、ガンマデルタTCR+細胞の高い割合（55.6 +/- 4.0％）もCD45RO分子を発現しました。したがって、ほとんどの安静時ガンマデルタTCR細胞は、類似したCD45アイソフォーム発現のパターンを示しましたが、「メモリ」アルファベータTCR細胞のパターンと同一ではありませんでした。ガンマデルタTCR細胞集団内では、CD45ROの発現は不均一でした。これは、V delta 1-j Delta 1型の受容体（Delta TCS-1+）の型を持つ細胞の19.8 +/- 5.9％のみがUCHL1（CD45RO）+であったためです。したがって、V Delta 1-J Delta 1の使用を備えたほとんどのガンマデルタTCRセルは、「ナイーブ」アルファベータTCR細胞のそれに似たCD45アイソフォームプロファイルを示しました。これらの表現型の特徴はPHA刺激時に変化しました：5日間の培養後、UCHL1を発現するTCR Delta-1 +細胞の割合は86.0 +/- 3.1％に増加し、DELTA TCS-1でCD45RO発現の2倍の増加も観察されました+亜集団。

We first compared the proliferative activity of alpha beta T cell receptor (TCR) (beta F1+) and gamma delta TCR (TCR delta-1+) human T cells after phytohaemagglutinin (PHA) stimulation by using double-colour immunofluorescence staining with Ki67 and anti-BrdU monoclonal antibodies (MoAbs). The dividing activity was higher within the alpha beta TCR cells: after 3 days of culture 69.9 +/- 5.9% of beta F1+ cells expressed Ki67, and 44.8 +/- 4.8% of these cells synthesized DNA as revealed by BrdU incorporation. In contrast, only 18.9 +/- 1.6% and 12.0 +/- 1.2% of TCR delta-1+ cells in the same samples were Ki67+ and BrdU+, respectively. Cells with V delta 1-J delta 1 usage (delta TCS-1+) showed a higher cycling activity than the rest of gamma delta TCR cells: after 3 days of PHA stimulation, 51.1 +/- 18.3% and 18.3 +/- 6.1% of such cells were in cycle and synthesized DNA, respectively. Next, we studied the expression of CD45 isoforms on peripheral blood alpha beta TCR and gamma delta TCR lymphocytes. Within the alpha beta TCR cells, two distinct subpopulations were distinguishable after labelling with SN130 (CD45RA) MoAb: 64.1 +/- 10.2% were bright, and 35.9 +/- 10.2% were dim or negative. Likewise, most TCR delta-1+ cells expressed SN130 (CD45RA): 87.5 +/- 3.0% were bright and 12.5 +/- 3.0% were dim. However, in contrast to alpha beta TCR+ cells, a high proportion (55.6 +/- 4.0%) of gamma delta TCR+ cells also expressed CD45RO molecules. Thus, most resting gamma delta TCR cells showed a pattern of CD45 isoform expression similar but not identical to that of 'memory' alpha beta TCR cells. Within the gamma delta TCR cell population the expression of CD45RO was heterogeneous because only 19.8 +/- 5.9% of cells bearing the V delta 1-J delta 1 form of the receptor (delta TCS-1+) were UCHL1 (CD45RO)+. Therefore, most gamma delta TCR cells with V delta 1-J delta 1 usage showed a CD45 isoform profile resembling that of 'naive' alpha beta TCR cells. These phenotypic features changed upon PHA stimulation: after 5 days of culture the proportion of TCR delta-1+ cells expressing UCHL1 increased to 86.0 +/- 3.1% and a two-fold increase in CD45RO expression was also observed in the delta TCS-1+ subpopulation.