ネコ肺アエルロストロントン症アブストラス（Nematoda、Strongylida）のリボソームDNAに特異的なネストされたPCRの診断および臨床的意味

Aelurostrongylus abstrusus（Nematoda、Strongylida、Metastrongyloidea）は、猫のコスモポリタンな寄生虫であり、重度の呼吸困難を引き起こします。ネコのアエルロストロンゲ症の生物学と疫学に関する情報は、主に古典的な診断に固有の限界が原因であるためです。現在の研究では、リボソームDNAの2番目の内部転写スペーサー（ITS2）での遺伝子マーカーの使用に基づいた2段階のネストPCRが、異なる生物学的サンプルのAbstrususについて確立されました。ITS2（長さ321 bp）の特性評価により、39.5％のG+C含有量が明らかになりました。A. abststrususのITS2と他の一般的なネコ内部エンドパラサイトのシーケンスの違いを活用するために、特定のプライマーがPCRによって特異性と感度について設計およびテストされました。PCRアッセイは、糞便感染症の既知の歴史を持つ猫の糞便（糞便、浮選上清、および咽頭スワブサンプルの糞便（すなわち、糞便、浮選上清、および咽頭スワブサンプル）で検証され、100％の特異性と96.6.6までの感受性を示しました。％。また、ネストされたPCRは、実際に感染したが古典的な診断方法によって陰性である猫を特定することができました。このPCR法は、ネコエルロストロンゲ症の分子診断のための強力なツールであり、古典的な診断の制約を克服することが示されました。中間宿主と決定的な宿主の両方のさらなる生物脂質物学的研究のためのこのような分子ツールの意味について議論されています。

Aelurostrongylus abstrusus (Nematoda, Strongylida, Metastrongyloidea) is a cosmopolitan parasite of cats and causes severe respiratory distress. Information on the biology and epidemiology of feline aelurostrongylosis is fragmentary, mainly due to the limits inherent in the classical diagnosis. In the present work, a two-step nested PCR based on the use of genetic markers in the second internal transcribed spacer (ITS2) of ribosomal DNA was established for A. abstrusus in different biological samples. Characterization of the ITS2 (321 bp of length) revealed a G+C content of 39.5%. To exploit the sequence difference between the ITS2 of A. abstrusus and those of other common feline endoparasites, specific primers were designed and tested by PCR for their specificities and sensitivities. The PCR assay was validated on a panel of fecal (i.e., feces, flotation supernatant, and Baermann sediment) and pharyngeal swab samples from cats with known histories of lungworm infections, and it showed a specificity of 100% and a sensitivity of up to 96.6%. Also, the nested PCR was able to identify cats that were actually infected but that tested negative by the classical diagnostic methods. This PCR method was shown to be a powerful tool for the molecular diagnosis of feline aelurostrongylosis, overcoming the constraints of the classical diagnosis. The implications of such a molecular tool for further bioepidemiological studies of both intermediate and definitive hosts have been discussed.