コエンザイムA-SHの効果に関する研究：アセチルコーエンザイムA、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド：ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの減少、およびアデノシン二リン酸：アデノシン三リン酸比

ラット心臓ミトコンドリアの懸濁液のコエンザイムA-SH（COASH）およびアセチルCoAの含有量は、呼吸器阻害剤ロテノンの存在下で、DL-カルニチンとアセチル-DL-カルニチンの添加により安定化されました。NAD+およびNADHのミトコンドリア含有量は、アセトアセテートとDL-3-ヒドロキシブチレートの添加により同様に安定化され、ADPおよびATPの含有量は、これらのヌクレオチドをミトコン症懸濁液に添加することにより、不整合剤とオリゴマイキニンの存在の存在下で課されました。、ATPaseを阻害します。これらの条件下では、ミトコンドリアコッシュ/アセチルCoA、NAD+/NADH、およびADP/ATP比は独立して変化する可能性があり、活性および不活性なピルビン酸デヒドロゲナーゼの相互変換への影響を研究できます。Coash/Acetyl-CoAおよびNad+/NADH比の両方の減少は、ピルビン酸デヒドロゲナーゼの定常状態活性に対して阻害されることが示されており、この効果は、3つの異なるADP/ATP比および添加MGCL2の異なる濃度で説明されています。Coash/Acetyl-CoAまたはNAD+/NADH比の変化から10分以内に、新しい定常状態レベルの活動が達成されました。不活性化の速度は、これらの条件下での再活性化速度よりもはるかに高かった。Coash/Acetyl-CoaおよびNad+/Nadhの効果は加法である可能性がありますが、ADP/ATP比の変化によって誘導されるピルビン酸デヒドロゲナーゼの活性の変化よりも定量的に低いです。ADP/ATP比を伴うピルビン酸デヒドロゲナーゼの活性の変動は、他の2つの比率の変化がない場合に記載されています。これは、3つの比率すべての変化を生成するために異なる基質の酸化を採用した以前の研究では満たされなかった条件です。

The content of coenzyme A-SH (CoASH) and acetyl-CoA of suspensions of rat heart mitochondria was stabilized by the addition of DL-carnitine and acetyl-DL-carnitine, in the presence of the respiratory inhibitor rotenone. The mitochondrial content of NAD+ and NADH was similarly stabilized by the addition of acetoacetate and DL-3-hydroxybutyrate, and the content of ADP and ATP was imposed by the addition of these nucleotides to the mitochondrial suspension, in the presence of uncoupling agent and oligomycin, to inhibit ATPase. Under these conditions, mitochondrial CoASH/acetyl-CoA, NAD+/ NADH, and ADP/ATP ratios could be varied independently, and the effect on the interconversion of active and inactive pyruvate dehydrogenase could be studied. Decreases in both CoASH/acetyl-CoA and NAD+/NADH ratios were shown to be inhibitory to the steady state activity of pyruvate dehydrogenase, and this effect is described at three different ADP/ATP ratios and different concentrations of added MgCl2. A new steady state level of activity was achieved within 10 min of a change in either CoASH/acetyl-CoA or NAD+/NADH ratio; the rate of inactivation was much higher than the rate of reactivation under these conditions. Effects of CoASH/acetyl-CoA and NAD+/NADH may be additive but are still quantitatively lesser than the changes in activity of pyruvate dehydrogenase induced by changes in ADP/ATP ratio. The variation in activity of pyruvate dehydrogenase with ADP/ATP ratio is described in the absence of changes in the other two ratios, conditions which were not met in earlier studies which employed the oxidation of different substrates to generate changes in all three ratios.