ユビキチンE3リガーゼMarch7は、脱ユビキチン化酵素USP7およびUSP9Xによって差別的に調節されています

1つ以上のユビキチン鎖によるタンパク質修飾は、広範囲の細胞プロセスにわたって重要なシグナル伝達機能に役立ちます。このシステム内の特異性は、基質を標的とするユビキチンE3リガーゼによって授与されます。それらの活性は、基質とリガーゼの両方からユビキチンを除去する脱ユビキチン化酵素（DUBS）によってバランスが取れています。環状リガーゼは、最初は免疫検査剤のダウンレギュレーションに関与するウイルス免疫エバシンとして同定されました。それらの細胞オーソログ、膜関連の環（3月）ファミリーは、古典的な環遺伝子のサブグループを表しています。ウイルスの対応物とは異なり、細胞リングCHタンパク質は高度に調節されているように見え、特にこれらの1つであるMarch7は、神経発達とリンパ球増殖における潜在的な役割のために興味深いものでした。このオーファンリガーゼの検出と発現の難しさは、3月7日の安定性に関与する細胞補因子の検索につながります。この研究では、March7が自己ユビキチン化を容易に受け、2つの非緩和酵素 - サイトゾルでユビキチン特異的プロテアーゼ（USP）9xと核でUSP7に関連することを示しています。外因性発現と短い干渉RNA枯渇実験は、March7がそれぞれサイトゾルと核でMarch7を脱線するUSP9XとUSP7の両方によって安定化できることを示しています。したがって、サイト固有のダブの動員を通じて、このE3リガーゼのコンパートメント固有の調節を示します。

Protein modification by one or more ubiquitin chains serves a critical signalling function across a wide range of cellular processes. Specificity within this system is conferred by ubiquitin E3 ligases, which target the substrates. Their activity is balanced by deubiquitylating enzymes (DUBs), which remove ubiquitin from both substrates and ligases. The RING-CH ligases were initially identified as viral immunoevasins involved in the downregulation of immunoreceptors. Their cellular orthologues, the Membrane-Associated RING-CH (MARCH) family represent a subgroup of the classical RING genes. Unlike their viral counterparts, the cellular RING-CH proteins appear highly regulated, and one of these in particular, MARCH7, was of interest because of a potential role in neuronal development and lymphocyte proliferation. Difficulties in detection and expression of this orphan ligase lead us to search for cellular cofactors involved in MARCH7 stability. In this study, we show that MARCH7 readily undergoes autoubiquitylation and associates with two deubiquitylating enzymes - ubiquitin-specific protease (USP)9X in the cytosol and USP7 in the nucleus. Exogenous expression and short interfering RNA depletion experiments demonstrate that MARCH7 can be stabilized by both USP9X and USP7, which deubiquitylate MARCH7 in the cytosol and nucleus, respectively. We therefore demonstrate compartment-specific regulation of this E3 ligase through recruitment of site-specific DUBs.