結核菌による機能的複合体形成の安定性と特異性を支配する分子的特徴CFP-10/ESAT-6ファミリータンパク質

Mycobacterium結核複合体CFP-10/ESAT-6ファミリータンパク質は、結核の病因において不可欠ではあるが不十分に定義された役割を果たします。この記事では、CFP-10/ESAT-6ファミリーの複数のメンバーの詳細な分光研究の結果を報告します。この作業は、CFP-10/ESAT-6関連タンパク質RV0287およびRV0288がタイトな1：1複合体を形成し、主に構造がらせん状であり、CFP-10とESAT-6によって形成された複合体に非常に似ていると予測されることを示しています。。さらに、RV0287.RV0288複合体は、CFP-10.ESAT-6よりも、化学的および温度誘導性変性の両方に対して有意に安定していることがわかりました。このアプローチは、RV0287.RV0288もCFP-10.ESAT-6複合体も低pH（4.5）で不安定であることを示しており、成熟ファゴソームなどの低pH環境でもRV0287.RV0288およびCFP-10の両方であることを示しています。ESAT-6は間違いなく個々のタンパク質ではなく複合体として機能します。CFP-10.ESAT-6複合体および最適化されたアミノ酸配列の構造の分析M.結核CFP-10/ESAT-6ファミリータンパク質のアライメントは、ヘリックス間の分子内接触に関与する残基がCFP-10全体で保存されていることを明らかにしました。/ESAT-6ファミリー。ただし、主に分子間接触に関与しているものではありません。この分析により、CFP-10/ESAT-6ファミリータンパク質間の複雑な形成の特異性と安定性の分子基盤が特定され、病因における重要な役割を伴う機能的複合体の形成がゲノムパートナー、または非常に密接に関連するファミリーに限定されることを示しています。RV0287/RV0288やRV3019C/RV3020Cなどのメンバー。

The Mycobacterium tuberculosis complex CFP-10/ESAT-6 family proteins play essential but poorly defined roles in tuberculosis pathogenesis. In this article we report the results of detailed spectroscopic studies of several members of the CFP-10/ESAT-6 family. This work shows that the CFP-10/ESAT-6 related proteins, Rv0287 and Rv0288, form a tight 1:1 complex, which is predominantly helical in structure and is predicted to closely resemble the complex formed by CFP-10 and ESAT-6. In addition, the Rv0287.Rv0288 complex was found to be significantly more stable to both chemical and temperature induced denaturation than CFP-10.ESAT-6. This approach demonstrated that neither Rv0287.Rv0288 nor the CFP-10.ESAT-6 complexes are destabilized at low pH (4.5), indicating that even in low pH environments, such as the mature phagosome, both Rv0287.Rv0288 and CFP-10.ESAT-6 undoubtedly function as complexes rather than individual proteins. Analysis of the structure of the CFP-10.ESAT-6 complex and optimized amino acid sequence alignments of M. tuberculosis CFP-10/ESAT-6 family proteins revealed that residues involved in the intramolecular contacts between helices are conserved across the CFP-10/ESAT-6 family, but not those involved in primarily intermolecular contacts. This analysis identified the molecular basis for the specificity and stability of complex formation between CFP-10/ESAT-6 family proteins, and indicates that the formation of functional complexes with key roles in pathogenesis will be limited to genome partners, or very closely related family members, such as Rv0287/Rv0288 and Rv3019c/Rv3020c.