エプスタインバーウイルス由来プラスミドは、細胞周期ごとに1回だけ複製され、細胞への侵入後に増幅されない

Epstein-Barrウイルス（EBV）プラスミドの維持起源であるORIPを含むプラスミドの複製が制御される可能性のあるいくつかの可能な方法を調査しました。実質的に、すべてのプラスミド分子は、薬物選択による細胞へのプラスミドの安定した導入後、または細胞にDNAを導入した後の最初の数細胞分裂中に、細胞への安定した導入後に複製が観察されたかどうかにかかわらず、細胞周期ごとに1回しか再現されないことがわかった。ORIP機能に必要な唯一のウイルスタンパク質であるEBNA1の過剰量の細胞における存在は、選択中の細胞によって維持されるORIP複製プラスミドの数を増加させませんでした。調査した細胞株では、EBNA1とORIPが、S期あたりのDNA分子ごとにDNA複製を制限する細胞制御をオーバーライドする能力がないようです。EBV由来の選択可能なプラスミドのマルチコピー状態は、多数のプラスミド分子の細胞による最初の取り込み、これらのプラスミドの効率的な維持、およびプラスミド喪失に対する遺伝的選択の圧力に起因するようです。他の未知のコントロールは、細胞の潜在感染後すぐにEBVゲノムの増幅に関与する必要があります。

Some possible ways in which replication of plasmids containing the Epstein-Barr virus (EBV) plasmid maintenance origin, oriP, might be controlled were investigated. Virtually all plasmid molecules were found to replicate no more than once per cell cycle, whether replication was observed after stable introduction of the plasmids into cells by drug selection or during the first few cell divisions after introducing the DNA into cells. The presence in the cells of excess amounts of EBNA1, the only viral protein needed for oriP function, did not increase the number of oriP-replicated plasmids maintained by cells under selection. In the cell lines studied, EBNA1 and oriP seem to lack the capacity to override the cellular controls that limit DNA replication to one initiation event per DNA molecule per S phase. The multicopy status of EBV-derived, selectable plasmids appears to result from the initial uptake by cells of large numbers of plasmid molecules, the efficient maintenance of these plasmids, and the pressure of genetic selection against plasmid loss. Other unknown controls must be responsible for the amplification of EBV genomes soon after latent infection of cells.